C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01)
Patent
CA 2163897
The present invention is directed to a method of amplifying and detecting single or double stranded target nucleic acid molecules, Amplification of the target nucleic acid molecule is accomplished by using at least two chemically modified oligonucleotide probes per target nucleic acid molecule to form a joined oligonucleotide product. Each oligonucleotide probe is comprised of a long and short sequence. The long sequence of each probe hybridizes to adjacent regions of the target nucleic acid molecule. The short sequences of each probe hybridize to each other. Chemical functionality groups attached to the short sequences of each oligonucleotide probe covalently combine linking the probes to form a joined oligonucleotide product. The joined oligonucleotide product is formed without the use of enzymes. The reactivity of the chemical functionality groups on each probe is target dependent. Only when the short sequences of adjacent probes are hybridized to each other are the chemical functionality groups on the probes brought into close enough proximity to form a covalent bond and join the probes to form a joined oligonucleotide product.
La présente invention a pour objet un procédé d'amplification et de détection de molécules cibles d'acide nucléiqe à simple et à double brin. L'amplification de la molécule cible d'acide nucléique est réalisée à l'aide d'au moins deux sondes d'oligonucléotides modifiées chimiquement par molécule cible d'acide nucléique, pour former un produit oligonucléotidique assemblé. Chaque sonde d'oligonucléotide se compose d'une séquence longue et d'une courte. La séquence longue de chaque sonde s'hybride avec des régions adjacentes de la molécule cible d'acide nucléique. Les séquences courtes de chaque sonde s'hybrident l'une avec l'autre. Les groupes de fonctionnalité chimique liés aux séquences courtes de chaque sonde d'oligonucléotide se combinent de façon covalente en liant les sondes pour former un produit oligonucléotidique assemblé. Le produit oligonucléotidique assemblé est formé sans utiliser d'enzymes. La réactivité des groupes de fonctionnalité chimique de chaque sonde est dépendante de la cible. Ce n'est que lorsque les séquences courtes de sondes adjacentes sont hybridées les unes avec les autres que les groupes de fonctionnalité chimique des sondes sont amenés à proximité suffisamment étroite pour former une liaison covalente et réunir les sondes pour former un produit oligonucléotidique assemblé.
Gowling Lafleur Henderson Llp
Imclone Systems Incorporated
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1651126