C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/82 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) C12P 7/62 (2006.01)
Patent
CA 2600882
Methods and constructs for the introduction of multiple genes encoding enzymes in a multi-enzyme biosynthetic pathway are provided. In one embodiment, the constructs contain two or more enzyme-encoding genes, each under the control of an inducible promoter and each with a polyadenylation signal. The constructs are used to produce transgenic plants, in which the expression of the enzymes are increased when a chemical inducing agent is applied, and a biosynthetic product of the series of enzymes encoded by the transgenes is produced. Constructs may be used which contain two or more enzyme-encoding genes under the control of one or more promoters activated by activator molecules or complexes expressed from a transgene or transgenes, which are themselves under the control of one or more inducible promoters and switched on following the external application of a chemical. The transgene or transgenes expressing the activator molecules or complexes may be included in the same construct containing multiple genes encoding enzymes in a multi- enzyme biosynthetic pathway. Alternatively, the transgene or transgenes expressing the activator molecules or complexes may be on a different construct from the construct containing multiple genes encoding enzymes in a multi-enzyme biosynthetic pathway. The activator molecule can be expressed using a constitutive promoter in an inactive form which is converted to the active form following application of the chemical inducing agent.
L'invention concerne des méthodes et des constructions pour l'introduction de gènes multiples codant pour des enzymes dans une voie biosynthétique à enzymes multiples. Dans un mode de réalisation, les constructions contiennent au moins deux gènes codant pour des enzymes, chacun sous le contrôle d'un promoteur inductible et comportant chacun un signal de polyadénylation. Ces constructions sont utilisées pour produire des plantes transgéniques, dans lesquelles l'expression des enzymes est accrue lorsqu'un agent induisant un produit chimique est appliqué, et un produit biosynthétique de la série d'enzymes codés par les transgènes est produit. Peuvent être utilisées des constructions contenant au moins deux gènes codant pour des enzymes, sous le contrôle d'au moins un promoteur activé par des molécules ou des complexes activateurs exprimés à partir d'un ou plusieurs transgènes, qui sont eux-mêmes sous le contrôle d'au moins un promoteur inductible et qui sont déclenchés consécutivement à l'application d'un produit chimique. Le ou les transgènes exprimant les molécules ou complexes activateurs peuvent être inclus dans la même construction contenant des gènes multiples codant pour des enzymes dans une voie biosynthétiques à enzymes multiples. En variante, le ou les transgènes exprimant les molécules ou les complexes activateurs peuvent se trouver sur une construction différente de celle contenant des gènes multiples codant pour les enzymes d'une voie biosynthétique à enzymes multiples. La molécule activatrice peut être exprimée au moyen d'un promoteur constitutif sous une forme inactive qui est convertie en forme active après l'application de l'agent induisant un produit chimique.
Kourtz Lauralynn
Peoples Oliver P.
Snell Kristi D.
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
Metabolix Inc.
LandOfFree
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