Chemiluminescent detection of hydrolytic enzymes using an...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

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C12Q 1/28 (2006.01) C09B 15/00 (2006.01) C12Q 1/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 21/76 (2006.01) G01N 33/535 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)

Patent

CA 2197668

A chemiluminescent assay method, compositions and kits are described which use a protected phenolic enhancer compound which is deprotected by a hydrolytic enzyme and then enhances a chemiluminescent reaction. The reaction involves an acridan compound, preferably a derivative of an N-alkyl-acridan-9-carboxylic acid, which is activated to produce light by a peroxide compound and a peroxidase enzyme in the presence of the deprotected enhancer. The result is enhanced generation of light from the reaction. The hydrolytic enzyme is present alone or linked to a member of a specific binding pair in an immunoassay, DNA probe assay or other assay where the hydrolytic enzyme is bound to a reporter molecule.

Procédé de détection par chimioluminescence et compositions et trousses associées, dans lesquels on utilise un composé activateur phénolique protégé, qui, lorsqu'il est déprotégé par une enzyme hydrolytique, amplifie une réaction. La réaction fait appel à un composé d'acridan, de préférence à un dérivé d'un acide N-alkyl-acridan-9-carboxylique, qui est activé pour produire de la lumière par un composé de peroxyde et par une enzyme de type peroxydase en présence de l'activateur déprotégé. Il résulte de la réaction une production accrue de lumière. L'enzyme hydrolytique est présente seule ou liée à l'un des éléments d'une paire de liaison spécifique dans un dosage immunologique, dans un dosage par sonde d'ADN ou dans d'autres types de dosages où l'enzyme hydrolytique se trouve liée à une molécule reporteur.

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