Chimeric human growth hormone derived from the placenta and...

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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Details

C07K 14/61 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01)

Patent

CA 2558760

The present invention relates to a novel hGH-NV cDNA chimera having SEQ ID NO: 3 encoding human growth hormone. The invention also relates to a process for obtaining novel hGH-NV cDNA chimera from the cDNA isoforms of human placenta and pituitary RNA, by amplifying the cDNA isoforms by reverse transcription using gene specific primers, cloning the amplified cDNA isoforms, digesting the cloned cDNA isoforms at specific restriction endonuclease sites followed by replacing the digested cDNA isoform hGH-V fragment specific region by a hGH- N fragment to obtain hGH-NV cDNA chimera. Further the novel hGH-NV cDNA chimera is used as a template to obtain an expressible construct containing the fragment having SEQ ID NO: 5 to produce mature human growth hormone.

La présente invention concerne une nouvelle chimère d'ADNc hGH-NV possédant SEQ ID NO :3 codante pour une hormone de croissance humaine. Cette invention concerne aussi un processus permettant d'obtenir une nouvelle chimère d'ADNc hGH-NV à partir d'isoformes d'ADNc de placenta humain et d'ARN d'hypophyse, par amplification de ces isoformes d'ADNc par transcription inverse au moyen d'amorces spécifiques de gènes, par clonage des isoformes d'ADNc amplifiées, par digestion des isoforme d'ADNc clonées à des sites d'endonucléase de restriction spécifiques, suivie par le remplacement de régions spécifiques de fragment d'isoformes d'ADNc digérées par un fragment hGH-N de façon à obtenir une chimère d'ADNc hGH-NV. Par ailleurs, la nouvelle chimère d'ADNc hGH-NV est utilisée comme matrice de façon à obtenir un construit capable d'expression contenant le fragment possédant SEQ ID N0: 5 afin de produire une hormone de croissance humaine mature.

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