C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/60 (2006.01) C07K 16/40 (2006.01) C12N 1/20 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 9/88 (2006.01) C12N 15/01 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) C12Q 1/527 (2006.01)
Patent
CA 2221193
Mutant Proteus vulgaris strains are provided that, when grown in the absence of an exogenous chondroitinase I and II inducer, produce P. vulgaris chondroitinase I and chondroitinase II proteins. The mutants typically produce chondroitinase I and II proteins in the absence of exogenous inducers and in amounts in excess of those produced by wild-type P. vulgaris strains induced with such inducers. Two classes of such mutants, Classes 1 and 2, are disclosed. Class 1 and class 2 mutants differ in the relative amounts of chondroitinases I and II produced when cells are grown in casamino acids - supplemented minimal medium. Additional phenotypic variants that release chondroitinase I protein into the culture medium are provided as well. Also contemplated is a method for producing P. vulgaris chondroitinase I and II proteins. The mutant cells described above are cultured in the absence of a conventional exogenous chondroitinase I and II inducer, after which the cells are harvested and chondroitinase I and II are recovered from the harvested cells. A method for in situ detection of chondroitinase I and II production by bacterial colonies is also provided.
L'invention concerne des souches mutantes de Proteus vulgaris qui, mises en culture en l'absence d'un inducteur exogène de chrondroitinase I et II, produisent des protéines de chrondroitinase I et chrondroitinase II du P. vulgaris. Les mutants produisent généralement des protéines de chrondroitinase I et II en l'absence d'inducteurs exogènes et en des quantités excédant celles produites par des souches de P. vulgaris de type sauvage, induites par ces inducteurs. Deux classes de mutants de ce type, de classe 1 et classe 2 sont décrites. Les mutants de classe 1 et classe 2 diffèrent en ce qui concerne les quantités relatives de chrondroitinases I et II produites lorsque des cellules sont développées dans un milieu minimal complémenté par des acides casaminés. L'invention concerne également d'autres variantes phénotypiques qui libèrent la protéine chrondroitinase I dans le milieu de culture. L'invention concerne également un procédé pour produire des protéines de chrondroitinase I et II du P. vulgaris. Les cellules mutantes décrites plus haut sont mises en culture en l'absence d'un inducteur classique exogène de chrondroitinase I et II, après quoi les cellules sont récoltées et la chrondroitinase I ainsi que la chrondroitinase II sont récupérées à partir des cellules récoltées. L'invention a aussi pour objet un procédé pour la détection in situ de la production de chrondroitinase I et II par des colonies bactériennes.
Khandke Kiran Manohar
Lotvin Jason Arnold
Ruppen Mark Edward
American Cyanamid Company
Smart & Biggar
LandOfFree
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