C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/88 (2006.01) A61K 38/46 (2006.01) A61K 38/51 (2006.01) C12N 9/16 (2006.01) C12Q 1/34 (2006.01) C12Q 1/527 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)
Patent
CA 2188159
Chondroitinase II, a protein having an isoelectric point of approximately 8.4-8.45 and an apparent molecular mass of 112 kDa when electrophoresed in a 4 to 20 % gradient acrylamide gel in 25 mM Tris/192 mM glycine buffer at pH 8.5 in the presence of about 0.1 % (w/v) SDS, has been isolated and purified. A process for the copurification by affinity chromatography of the chondroitinase I and chondroitinase II proteins produced by Proteus vulgaris is also provided. The proteins can be further purified by metal chelating chromatography. Therapeutic or surgical compositions of isolated chondroitinases I and II or the copurified mixture of chondroitinases I and II are also disclosed. These compositions are used in a method for selectively and completely disinserting the vitreous body from the neural retina of an eye.
On a isolé et purifié la chondroitinase II, une protéine dont le point isoélectrique se situe entre environ 8,4 et 8,45, et d'un poids moléculaire apparent de 112 kDa lorsqu'elle est soumise à une électrophorèse sur un gel d'acrylamide d'un gradient de 4 à 20 %, dans un tampon de 192 mM glycine /25mM Tris, à un pH de 8,5 et en présence d'environ 0,1 % (poids/volume) de SDS. L'invention se rapporte également à un procédé de co-purification par chromatographie à affinité des protéines chondroitinase I et chondroitinase II produites par Proteus vulgaris. Ces protéines peuvent être davantage purifiées par chromatographie à chélation métallique. Des compositions thérapeutiques ou chirurgicales des chondroitinases I et II isolées ou du mélange co-purifié des chondroitinases I et II sont également décrites, ces compositions étant utilisées dans un procédé permettant d'extraire sélectivement et entièrement le corps vitré de la rétine neurale d'un oeil.
Eul Ursula
Gotto John
Khandke Kiran Manohar
American Cyanamid Company
Smart & Biggar
LandOfFree
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