Circular nucleic acid vectors, and methods for making and...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/63 (2006.01) A61K 31/711 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)

Patent

CA 2494772

Circular nucleic acid vectors that provide for persistently high levels of protein expression are provided. The circular vectors of the subject invention are characterized by being devoid of expression-silencing bacterial sequences, where in many embodiments the subject vectors include a unidirectional site- specific recombination product hybrid sequence in addition to an expression cassette. Also provided are methods of using the subject vectors for introduction of a nucleic acid, e.g., an expression cassette, into a target cell, as well as preparations for use in practicing such methods. The subject methods and compositions find use in a variety of different applications, including both research and therapeutic applications. Also provided is a highly efficient and readily scalable method for producing the vectors employed in the subject methods, as well as reagents and kits/systems for practicing the same.

L'invention concerne des vecteurs circulaires d'acides nucléiques fournissant en continu des niveaux élevés d'expression protéique. Les vecteurs circulaires selon l'invention sont caractérisés en ce qu'ils sont exempts de séquences bactériennes de répression de l'expression; dans plusieurs modes de réalisation, les vecteurs selon l'invention comprennent une séquence hybride unidirectionnelle de produit de recombinaison spécifique au site conjointement à une cassette d'expression. L'invention concerne également des procédés d'utilisation des vecteurs selon l'invention aux fins d'introduction d'un acide nucléique, par exemple une cassette d'expression, dans une cellule cible, ainsi que des préparations destinées à être utilisées dans la mise en oeuvre de tels procédés. Les procédés et compositions selon l'invention sont utiles dans une palette d'applications diverses, notamment des applications liées à la recherche et des applications thérapeutiques. L'invention concerne enfin un procédé très efficace et facilement adaptable permettant de produire les vecteurs employés dans les procédés selon l'invention, ainsi que des réactifs et des kits/systèmes permettant de mettre en oeuvre ceux-ci.

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