Complementing cell lines

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 5/00 (2006.01) A61K 39/235 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 7/01 (2006.01) C12N 7/02 (2006.01) C12N 15/86 (2006.01) C12N 15/861 (2006.01) C12N 5/08 (2006.01)

Patent

CA 2428739

A packaging cell line capable of complementing recombinant adenoviruses based on serotypes from subgroup B, preferably adenovirus type 35. The cell line is preferably derived from primary, diploid human cells (e.g., primary human retinoblasts, primary human embryonic kidney cells and primary human amniocytes) which are transformed by adenovirus E1 sequences. Also disclosed is a cell line derived from PER.C6 (ECACC deposit number 96022940), which cell expresses functional Ad35 E1B sequences. The new cell lines are useful for producing recombinant adenoviruses designed for gene therapy and vaccination. The cell lines can also be used for producing human recombinant therapeutic proteins. In addition, the cell lines are useful for producing human viruses other than adenovirus such as influenza virus, herpes simplex virus, rotavirus, measles virus.

L'invention concerne une lignée cellulaire d'encapsidation capable de complémenter des adénovirus recombinants basés sur des sérotypes du sous-groupe B, de préférence l'adénovirus de type 35. La ligne cellulaire est, de préférence, dérivée de cellules humaines diploïdes (p. ex. des rétinoblastes humains primaires, des cellules primaires humaines rénales embryonnaires et des amniocytes humains) qui sont transformées par des séquences de l'adénovirus E1 soit liées de manière fonctionnelle à une molécule d'ADN soit situées sur deux molécules séparées d'ADN, les séquences étant liées de manière fonctionnelle à des séquences régulatrices permettant la transcription et la traduction de protéines codées. L'invention concerne également une lignée cellulaire dérivée de PER.C6 (ECACC, numéro de dossier 96022940), la cellule exprimant des séquences Ad35 E1B fonctionnelles. Les séquences Ad35 E1B sont commandées par le promoteur E1B ou un promoteur hétérologue et terminées par un signal de polyadénylation hétérologue. Les nouvelles lignées cellulaires sont utiles dans la production d'adénovirus recombinants conçus pour la thérapie génique et la vaccination. Les lignées cellulaires peuvent également être préparées pour produire des protéines thérapeutiques recombinantes humaines, telles que des facteurs de croissance humains et des anticorps humains. Les lignées cellulaires, par ailleurs, sont utiles pour produire des virus humains, autres que l'adénovirus, tels que le virus de la grippe, le virus herpès simplex, les rotavirus et le virus de la rougeole.

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