Compositions and methods for detecting vancomycin resistant...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2294565

A method for determining the presence of vancomycin antibiotic resistant gene of enterococci in a biological sample, comprising the steps of (a) treating cells contained within the biological sample to expose single stranded-target nucleic acid molecules; (b) reacting the target single-stranded cellular nucleic acids with probe(s) nucleic acid sequence complementary to a portion of the antibiotic vancomycin resistant gene and the probe having a scissile linkage, and with an enzyme molecule, under conditions, which allow the target and probe to hybridize to each other and form a double-stranded, target-probe complex, the enzyme molecule being capable of cleaving the scissile link of the target-probe complex such that one or more fragments of the nucleic acid probe is released from said complex; and (c) determining whether cleaved portions of the nucleic acid probe are produced, and thereby detecting the presence of a vancomycin antibiotic resistant gene.

L'invention concerne un procédé pour déterminer la présence d'un gène d'entérocoques résistant à l'antibiotique vancomycine, dans un échantillon biologique. Ce procédé comprend les étapes consistant à (a) traiter les cellules contenues dans l'échantillon biologique pour exposer les molécules d'acide nucléique à simple brin; (b) faire réagir les acides nucléiques cellulaires cibles à simple brin avec des séquences d'acide nucléiques sondes complémentaires d'une partie d'un gène résistant à l'antibiotique vancomycine et de la sonde présentant une liaison pouvant être scindée, et avec une molécule enzymatique, dans des conditions qui permettent à la cible et à la sonde de s'hybrider l'un à l'autre et de former un complexe cible-sonde à double brins, la molécule enzymatique pouvant cliver la liaison pouvant être scindée du complexe cible-sonde et enfin (c) déterminer si les parties clivées de l'acide nucléique sonde sont produites et ainsi détecter la présence d'un gène résistant à l'antibiotique vancomycine.

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