C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/70 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)
Patent
CA 2476365
The present invention provides a method for identifying whether a compound inhibits entry of a virus into a cell which comprises: (a) obtaining nucleic acid encoding a viral envelope protein from a patient infected by the virus; (b) co-transfecting into a first cell (i) the nucleic acid of step (a), and (ii) a viral expression vector which lacks a nucleic acid encoding an envelope protein, and which comprises an indicator nucleic acid which produces a detectable signal, such that the first cell produces viral particles comprising the envelope protein encoded by the nucleic acid obtained from the patient; (c) contacting the viral particles produced in step (b) with a second cell in the presence of the compound, wherein the second cell expresses a cell surface receptor to which the virus binds; (d) measuring the amount of signal produced by the second cell in order to determine the infectivity of the viral particles; and (e) comparing the amount of signal measured in step (d) with the amount of signal produced in the absence of the compound, wherein a reduced amount of signal measured in the presence of the compound indicates that the compound inhibits entry of the virus into the second cell.
La présente invention concerne une méthode d'identification permettant de déterminer si un composé inhibe l'entrée d'un virus dans une cellule, consistant : (a) à obtenir un acide nucléique codant pour une protéine d'enveloppe virale provenant d'un patient infecté par le virus ; (b) à co-transfecter, dans une première cellule (i), l'acide nucléique de l'étape (a) et (ii) un vecteur viral d'expression ne contenant pas d'acide nucléique codant pour une protéine d'enveloppe et qui comprend un acide nucléique indicateur produisant un signal décelable, de façon que la première cellule produise des particules virales comprenant la protéine d'enveloppe codée par l'acide nucléique obtenu à partir du patient ; (c) à mettre les particules virales produites dans l'étape (b) en contact avec une seconde cellule en présence du composé, la seconde cellule exprimant un récepteur cellulaire de surface sur lequel le virus se fixe ; (d) à mesurer le signal produit par la seconde cellule pour déterminer l'infectiosité des particules virales ; et (e) à comparer le signal mesuré dans l'étape (d) au signal produit en l'absence du composé, un signal plus faible en présence du composé indiquant que le composé inhibe l'entrée du virus dans la seconde cellule.
Huang Wei
Little Susan
Parkin Neil T.
Petropoulos Christos J.
Richman Douglas
Monogram Biosciences Inc.
Osler Hoskin & Harcourt Llp
Virologic Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1985206