Compositions and methods for the rapid analysis of...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/06 (2006.01) G01N 1/30 (2006.01) G01N 15/14 (2006.01) G01N 33/49 (2006.01) G01N 33/80 (2006.01)

Patent

CA 2218728

A method and reagent for the simultaneous or independent enumeration of reticulocytes in a whole blood sample, without the need to separately incubate the sample and reagent. The reagent contains a reticulocyte staining amount of an unsymmetrical cyanine dye, from about 40 mM to about 60 mM of a buffer selected from the group consisting of imidazole, Tris and Bis-Tris and a dye stabilizing amount of a non-ionic surfactant selected from the group consisting of N, N-bis[3-D- Glucon-amidopropyl] cholamide and a polyoxypropylene--polyoxyethylene block copolymer. The reagent has a pH from about 6.8 to about 7.2 and an osmolarity adjusted to about 280 to about 310 mOsm/l with a mono- or divalent alkali salt selected from the group consisting of NaCl, KCl, LiCl, CaCl2, MgCl2 and ZnCl2. The method utilizes the reagent in a no incubation process that also allows for the simultaneous determination of CBC as well as reticulocyte counts and maturity indices.

L'invention se rapporte à un procédé et à un réactif utilisés dans la numération simultanée ou indépendante des réticulocytes dans un échantillon de sang entier sans qu'il soit nécessaire d'incuber séparément l'échantillon et le réactif. Le réactif contient une quantité d'un colorant de cyanine asymétrique pour réticulocytes, entre environ 40 mM et environ 60 mM d'un tampon sélectionné dans le groupe constitué par imidazole, Tris et Bis-Tris et une quantité apte à stabiliser le colorant d'un tensioactif non ionique sélectionné dans le groupe constitué par N, N-bis[3-D-Glucon-amidopropyl] cholamide et d'un copolymère en bloc de polyoxypropylène-polyoxyéthylyène. Le réactif a un pH compris entre environ 6,8 et environ 7,2 et une osmolarité ajustée entre environ 280 et environ 310 mOsm/l avec un sel alcalin monovalent ou bivalent sélectionné dans le groupe constitué par NaCl, KCl, LiCl, CaCl2, MgCl2 et ZnCl2. Le procédé met en oeuvre le réactif dans un processus sans incubation qui permet également de déterminer simultanément la numération globulaire (CBC) ainsi que des numérations réticulocytaires et des indices de maturité.

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