Compositions comprising high concentration of biologically...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/10 (2006.01) C07K 1/14 (2006.01) C07K 1/36 (2006.01)

Patent

CA 2685069

Large scale processes for producing high purity samples of biologically active molecules of interest from bacterial cells are disclosed. The methods comprise the steps of producing a lysate solution by contacting a cell suspension of said plurality of cells with lysis solution; neutralizing said lysate solution with a neutralizing solution to produce a dispersion that comprises neutralized lysate solution and debris; filtering the dispersion through at least one filter; performing ion exchange separation on said neutralized lysate solution to produce an ion exchange eluate; and performing hydrophobic interaction separation on said ion exchange eluate to produce a hydrophobic interaction solution. Further, provided are compositions comprising large scale amounts of plasmid DNA produced by the disclosed large scale processes.

L'invention concerne des procédés à grande échelle pour produire des échantillons de haute pureté de molécules biologiquement actives d'intérêt à partir de cellules bactériennes. Les procédés comprennent les étapes de production d'une solution de lysat par mise en contact d'une suspension de cellule de ladite pluralité de cellules avec une solution de lyse ; la neutralisation de ladite solution de lysat avec une solution neutralisante pour produire une dispersion qui comprend une solution de lysat neutralisée et des débris ; la filtration de la dispersion à travers au moins un filtre ; la réalisation d'une séparation d'échange d'ions sur ladite solution de lysat neutralisée pour produire un éluat d'échange d'ions ; et la réalisation d'une séparation d'interaction hydrophobe sur ledit éluat d'échange d'ions pour produire une solution d'interaction hydrophobe. En outre, des compositions comprenant des quantités à grande échelle d'ADN plasmidique produit par les procédés à grande échelle révélés sont proposées.

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