C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/96 (2006.01) C12Q 1/28 (2006.01) G01N 21/76 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/531 (2006.01)
Patent
CA 2451582
A method for enhancing the conversion of a phenol substrate to a product by a peroxidase enzyme comprises the steps of reacting a conjugate comprising a detectably labeled phenol-containing molecule with a peroxidase enzyme in the presence of an enhancing reagent, the enhancing reagent comprising an organic compound having the structure of Formula (I) wherein each R is independently selected from the group consisting of: hydrogen and a C1-12 sustituent; where V, W, Y, and Z are each independently selected from the group consisting of: H, halogen, the C1-12 substituent, NR2, OR and SR; and where X is selected from the group consisting of: H, Br, Cl, F, the C1-12 substituent, NR2, OR and SR; or synergistic mixtures of an inorganic salt and the organic compound. The C1-12 substituent is linear, branched or cyclic. The C1-12 substituent is alkyl, alkenyl, alkynyl, heteroatom substituted alkyl, heteroatom substituted alkenyl, heteroatom substituted alkynyl, aryl, arylalkyl, arylalkenyl or arylalkynyl. Further, the heteroatom is N, O, S or halogen. Any C, N, O or S in the C1-12 substituent optionally has a pendant moiety which is carbonyl, hydroxyl, carboxyl, amine, thiol, thioester, thioether, phosphate, alkoxy, aryl, arylalkyl, sulfonamide or alkyl halide. A kit is provided containing an enhancing reagent for enhancing the detection of an enzyme reaction as described herein, together with instructions for use.
La présente invention concerne un procédé permettant d'améliorer la conversion d'un substrat phénolique en un produit par une enzyme peroxydase comportant les étapes de réaction d'un conjugué comportant une molécule phénolée marquée de manière détectable avec une enzyme peroxydase en présence d'un réactif d'activation, le réactif d'activation comportant un composé organique ayant la structure de formule (I), dans laquelle: chaque R est indépendamment choisi parmi le groupe constitué de: l'hydrogène et un substituant en C¿1?-C¿12?; V W, Y et Z sont chacun indépendamment choisis parmi le groupe constitué de: H, halogène, le substituant en C¿1?-C¿12?, NR¿2?, OR et SR; et X est choisi parmi le groupe constitué de: H, Br, Cl, F, le substituant en C¿1?-C¿12?, NR¿2?, OR, et SR; ou des mélanges synergiques d'un sel organique et le composé organique. Le substituant en C¿1?-C¿12? est alkyle, alcényle, alcynyle, alkyle à hétéroatome de substitution, alcényle à hétéroatome de substitution, alcynyle à hétéroatome de substitution, aryle, arylalkyle, arylalcényle ou arylalcynyle. Par ailleurs, l'hétéroatome est N, O, S ou halogène. Tout C, N, O ou S dans le substituant C¿1?-C¿12? comprend éventuellement un groupe fonctionnel pendant qui est carbonyle, hydroxyle, carboxyle, amine, thiol, thioester, thioether, phosphate, alcoxy, aryle, arylalkyle, sulfonamide ou halogénure d'alkyle. L'invention concerne également une trousse contenant un réactif d'activation pour l'amélioration de la détection d'une réaction enzymatique, ainsi que le mode d'emploi.
Perkinelmer Life Sciences Inc.
Ridout & Maybee Llp
LandOfFree
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