C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/10 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2668818
This invention provides compositions and methods for rapid separation, isolation and purification of nucleopolymers, especially nucleic acids, from biological samples. using anionic exchange media. The method of the present invention can utilize commercially available strong or weak anion exchanger materials with selected solutions of known ionic strength for adsorption and elution. The medium/nucleoprotein bound complex may be optionally stored or transported, but is subsequently treated with appropriate eluents to remove any undesirable proteins, including destabilizing enzymes, and inorganic salts and the like. The partially purified complex may also be stored or transported prior to further processing. The instant method is particularly advantageous as it provides the means for rapid isolation and purification of soluble nucleic acids obtained from samples of biological fluids of comparatively large volume, allowing ease of handling and storage, and stabilizing the samples against degradation prior to analysis. It also permits the purification and identification of shorter fragments of nucleic acids from bodily fluids which, up till now, had not been identified. The method is widely useful as a means to prepare samples formats that are convenient in diagnostic analytical methods, particularly those that rely on the detection, characterization and identification of nucleic acid sequences, from body fluids.
Cette invention concerne des compositions et des procédés permettant la séparation rapide, l'isolation rapide et la purification rapide de nucléopolymères, plus particulièrement, des acides nucléiques à partir d'échantillons biologiques, au moyen d'un milieu d'échange anionique. Le procédé décrit dans cette invention consiste à utiliser des matériaux échangeurs d'anions forts ou faibles disponibles dans le commerce avec des solutions sélectionnées présentant une force ionique pour adsorption et l'élution. Le complexe lié milieu/nucléoprotréines peut être éventuellement stocké ou transporté, mais il est traité ultérieurement avec des solvants d'élution appropriés de manière à éliminer toutes les protéines indésirables, y compris les enzymes déstabilisantes et les sels inorganiques, etc. Le complexe partiellement purifié peut également être stocké ou transporté avant traitement ultérieur. Le procédé décrit dans cette invention est particulièrement avantageux car il constitue un moyen rapide pour isoler et purifier des acides nucléiques solubles obtenus à partir d'échantillons de fluides biologiques d'un volume comparativement plus important, ce qui facilite la manipulation et le stockage et permet de stabiliser les échantillons face à la détérioration avant une analyse. Ce mode de réalisation permet également de purifier et d'identifier des fragments plus courts d'acides nucléiques à partir de fluides biologiques, qui n'ont encore jamais été identifiés. Le procédé est largement utilisé pour préparer des formats d'échantillons pratiques dans des méthodes d'analyses à des fins diagnostiques, en particulier, les méthodes qui reposent sur la détection, la caractérisation et l'identification des séquences d'acides nucléiques, à partir de fluides corporels.
Feaver William John
Melkonyan Hovsep
Meyer Erik
Umansky Samuil
Ridout & Maybee Llp
Xenomics Inc.
LandOfFree
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