C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/48 (2006.01) C12Q 1/25 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 21/78 (2006.01) G01N 33/15 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Patent
CA 2395353
A method of detecting polynucleic acid polymerase activity, including DNA and RNA polymerase activity. The method includes providing a polynucleic acid primer-template complex labeled with a energy-emitting chemical species and a nucleotide labeled with a energy-emitting chemical species; mixing the polynucleic acid primer-template complex and the nucleotide with a sample comprising or suspected to comprise a polynucleic acid polymerase; prior to, contemporaneously with or after the mixing, exposing the labeled polynucleic acid primer-template complex and the labeled nucleotide to radiation of excitation wavelength for one of the energy-emitting chemical species to thereby excite that energy-emitting chemical species; and detecting a signal produced by energy transfer between the excited energy-emitting chemical species and the other energy-emitting chemical species as a result of incorporation of the nucleotide into the polynucleic acid primer-template complex via the activity of the polynucleic acid polymerase, the detection of the signal indicating polynucleic acid polymerase activity in the sample. Candidate compounds can also be identified as modulators of polynucleic acid polymerase activity via the method.
L'invention concerne une méthode permettant de détecter l'activité polymérase d'un acide nucléique, notamment l'activité de l'ADN et de l'ARN polymérase. Cette méthode consiste à fournir un complexe d'échantillon-amorce d'acide polynucléique marqué par une espèce chimique émettant de l'énergie, ainsi qu'un nucléotide également marqué par une espèce chimique émettant de l'énergie; à mélanger le complexe d'échantillon-amorce d'acide polynucléique et le nucléotide à l'aide d'un échantillon renfermant ou suspecté de renfermer une polymérase d'acide polynucléique; à exposer, pendant ou après le mélange, le complexe d'échantillon-amorce d'acide polynucléique marqué et le nucléotide marqué, à un rayonnement à une longueur d'onde d'excitation d'une espèce chimique émettant de l'énergie de façon à exciter ladite espèce; et à détecter un signal produit par le transfert d'énergie entre l'espèce chimique émettant de l'énergie excitée et l'autre espèce chimique émettant de l'énergie du fait de l'incorporation du nucléotide dans ledit complexe échantillon-amorce d'acide polynucléique, via l'activité de polymérase de l'acide polynucléique, la détection dudit signal indiquant une activité polymérase d'acide polynucléique dans l'échantillon. Les composés candidats peuvent également être identifiés sous forme de modulateurs de l'activité de polymérase d'acide polynucléique via ladite méthode.
Furfine Eric Steven
Porter David John Timothy
Roberts Grace Brashear
Glaxo Group Limited
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1933801