Conversion of red blood cells a, b, and ab using...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 9/24 (2006.01) C12N 5/078 (2010.01) A61K 35/14 (2006.01) C12N 1/20 (2006.01) C12N 9/40 (2006.01) C12Q 1/34 (2006.01)

Patent

CA 2460575

This invention relates to enzymatic removal of type A and B antigens from blood group A, B, and AB reactive cells in blood products, and thereby converting these to non-A and non-B reactive cells. The invention further relates to using unique a-N-acetylgalactosaminidases and a-galactosidases with superior kinetic properties for removing the immunodominant monosaccharides of the blood group A and B antigens and improved performance in enzymatic conversion of red blood cells.

Cette invention concerne l'extraction enzymatique d'antig­nes des types A et B des groupes sanguins A et B et de cellules r~actives AB dans des produits sanguins, et leur conversion en cellules r~actives non A et non B. Elle concerne ~galement l'utilisation de .alpha.-<i>N</i>-ac~tylgalactosaminidases et de .alpha.-galactosidases uniques poss~dant des propri~t~s cin~tiques sup~rieures, dans le but d'extraire les monosaccharides immunodominants des antig­nes des groupes sanguins A et B, et pour un rendement am~lior~ de la conversion enzymatique des ~rythrocytes. Les .alpha.-<i>N</i>-ac~tylgalactosaminidases et .alpha.-galactosidases uniques pr~f~r~s pr~sentent les caract~ristiques suivantes: i) une sp~cificit~ de substrat exclusive, pr~f~r~e ou non inf~rieure ~ 10 % pour les structures polysaccharidiques ramifi~es des types A et B relativement ~ une activit~ mesurable avec de simples structures mono- ou disaccharidiques et des d~riv~s d'aglycone; ii) un rendement optimal ~ pH neutre avec des oligosaccharides de groupe sanguin et en ce qui concerne la conversion enzymatique des cellules; et iii) une constante cin~tique K´m? favorable avec des substrats mono- ou oligosaccharidiques. Les m~thodes de conversion de l'invention utilisent des quantit~s sensiblement inf~rieures d'enzymes glycosidase recombinantes que les m~thodes ant~rieures et donnent lieu ~ une s~roconversion compl­te de tous les ~rythrocytes des groupes sanguins A et B

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