C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/08 (2006.01) A61K 35/14 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)
Patent
CA 2263728
A method for producing human dendritic cells (DC) for therapeutic purposes using serum-free, animal protein-free medium. The method involves culturing mononuclear cells from peripheral or umbilical cord blood or bone marrow of an individual human donor in a culture container having at least one inner surface of polystyrene in the above described medium containing at least one hematopoietic growth factor, and maintaining the culture to produce a culture enriched for DC. The DC enrichment is evidenced by at least about 10% of the total cells in the culture exhibiting DC processes, or at least 2.5 % of the total cells expressing at least one DC antigen such as CD80, CD86, or CD1a. The culture method is preferably carried out in a gas-permeable container in a closed fluid path system. The DC so produced can be pulsed with an antigen such as a viral, bacterial, tumor, or cell surface antigen, and the resulting primed dendritic cells can be co-cultured with T cells to produce antigen- specific human T-cells for therapeutic use. Useful for treatment of viral or bacterial infections, useful as a cancer vaccine, useful to induce tolerance when transplant of allo- or xeno-graft cells or organ is intended.
Méthode permettant de produire des cellules dendritiques de l'homme (CD) à des fins thérapeutiques en utilisant un milieu exempt de sérum et de protéines d'origine animale. La méthode consiste, d'une part, à cultiver des cellules mononucléaires provenant du sang périphérique ou celui du cordon ombilical, ou de la moelle osseuse d'un individu donneur, dans un réceptacle de culture possédant au moins une surface interne en polystyrène, dans le milieu susmentionné qui contient au moins un facteur de croissance hématopoïétique et, d'autre part, à entretenir ladite culture pour produire une culture enrichie en CD. L'enrichissement en CD se confirme lorsque des processus de CD se manifestent chez au moins 10 % de la totalité des cellules de la culture, ou lorsque au moins 2,5 % de la totalité des cellules expriment au moins un antigène CD tel que CD80, CD86 ou CD1a. La méthode de culture est, de préférence, appliquée dans un réceptacle perméable aux gaz, dans un système fermé de circuit de fluides. Les CD ainsi obtenues peuvent être activées par un antigène tel qu'un antigène viral, bactérien, tumoral ou celui de la surface cellulaire; on peut procéder à la co-culture des cellules dendritiques ainsi immunisées avec des lymphocytes T afin de produire des lymphocytes T humains spécifiques de l'antigène, utilisables à des fins thérapeutiques. Lesdites cellules peuvent servir pour traiter des infections virales ou bactériennes, en tant que vaccin contre le cancer et pour activer la tolérance lorsqu'il est prévu de transplanter un organe ou de greffer des cellules allo- ou xénogéniques.
Alzona Mortimer T.
Aono Frederick M.
Kowalkowski Kenneth L.
Smith Stephen L.
Unverzagt Kristen L.
Gowling Lafleur Henderson Llp
Nexell Therapeutics Inc.
LandOfFree
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