C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)
Patent
CA 2190592
A method of in vitro amplification of nucleic acid using amplification primers, wherein A pair of primers is used comprising oligonucleotide sequences sufficiently to a part of the direct repeat sequence of a microorganism belonging to the M. tuberculosis complex of microorganism for hybridization to a Direct Repeat to occur and subsequently elongation of the hybridized primer to take place, said primers being such that elongation in the amplification reaction occurs for one primer in the 5' direction and for the other primer in the 3' direction. A method of detection of a microorganism belonging to the M. tuberculosis complex of microorganisms comprising the above-mentioned amplification method, followed by carrying out a hybridization test in a manner known per se, using an oligonucleotide probe being sufficiently homologous to a part of a spacer of the Direct Region of a microorganism belonging to the M. tuberculosis complex for hybridization to occur, detecting any hybridized products in a manner known per se. Particular probes are also disclosed. A method for differentiating the type of microorganism belonging to the M. tuberculosis complex in a sample, comprising carrying out the above-mentioned method of detection. followed by comparison of the hybridization pattern obtained with a reference.
Procédé d'amplification in vitro d'acide nucléique à l'aide d'amorces d'amplification. Selon le procédé, on utilise une paire d'amorces comportant des séquences oligonucléotidiques suffisamment complémentaires à une partie de la séquence répétée directe d'un micro-organisme appartenant au complexe de micro-organismes de M. tuberculosis, pour permettre l'hybridation à une séquence répétée directe, puis l'allongement de l'amorce hybridée, lesdites amorces étant telles que l'allongement dans la réaction d'amplification se produit pour une amorce dans le sens 5' et pour l'autre amorce dans le sens 3'. On a également prévu un procédé de détection d'un micro-organisme appartenant au complexe de micro-organismes de M. tuberculosis, consistant à effectuer ledit procédé d'amplification puis à réaliser un test d'hybridation de manière connue en soi à l'aide d'une sonde oligonucléotidique suffisamment homologue à une partie d'un segment intermédiaire de la région directe d'un micro-organisme appartenant au complexe de M. tuberculosis, pour permettre l'hybridation, et à détecter de manière connue en soi les éventuels produits hybridés. On divulgue également des sondes particulières. En outre, on a prévu un procédé de différenciation du type de micro-organisme appartenant au complexe de M. tuberculosis dans un échantillon, consistant à effectuer ledit procédé de détection puis à comparer le modèle d'hybridation obtenu avec un modèle de référence.
Kamerbeek Judith
Schouls Leendert Marinus
Van Embden Johannes Dirk Anthonie
Mccarthy Tetrault Llp
Volksgezondheid En Cultuur de Staat Der Nederlanden Vertegenwoordigd Door de Minister Van W
LandOfFree
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