Detection of blood plasma amygdalin of dissipating blood...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 30/36 (2006.01) G01N 30/72 (2006.01) G01N 33/15 (2006.01) G01N 33/49 (2006.01)

Patent

CA 2685359

A detection method of blood plasma amygdalin of dissipating blood stasis botanical is disclosed. The method includes: (1) adding 2-5mol/L phosphoric acid to plasma of mammalian administered dissipating blood stasis botanical and mixing the solution of plasma-phosphoric acid (1:2-3, v/v), applying the solution to small column of Waters Oasis HLB activated by methanol and water; after leaching by water and 80-100% methanol and eluting by 0.2-1% ammonia-methanol, drying and enriching the eluent at 25-30°C; and redissolving with mobile phase; (2) UPLC/MS measuring: UPLC condition: chromatographic column: Acquity UPLC BEH C18, 2.1´100mm, mobile phase A: water-acetonitrile-formic acid 95:5:0.1 v/v/v, mobile phase B: acetonitrile-formic acid 100:0.1 v/v; MS condition: electric spraying ion source(ESI), detecting with positive ion mode, scanning at the range of m/z 150-800. The method can be used for pharmacokinetics study of amygdalin of dissipating blood stasis botanical.

L'invention concerne une méthode de détection d'amygdaline de plasma sanguin d'un extrait de plante éliminant l'hémostase. La méthode de l'invention consiste : (1) à ajouter 2-5 mol/L d'acide phosphorique à du plasma de mammifère auquel a été administré un extrait de plante éliminant l'hémostase et à mélanger la solution plasma-acide phosphorique (1:2-3, v/v), à appliquer la solution dans une petite colonne de Waters Oasis HLB activée par du méthanol et de l'eau; après lavage avec de l'eau et 80-100 % de méthanol et élution par 0,2-1 % d'ammoniac-méthanol, à sécher et à enrichir l'éluent à 25-30°C; et à redissoudre avec la phase mobile; (2) à mesurer par un procédé UPLC/MS : condition UPLC : colonne chromatographique : Activité UPLC BEH C18, 2.1´100mm, phase mobile A : eau-acétonitrile-acide formique 95:5:0.1 v/v/v, phase mobile B : acétonitrile-acide formique 100:0.1 v/v; condition MS : source ionique de pulvérisation électrique (ESI), à détecter en mode ions positifs, à balayer à une plage de 150-800 m/z. La méthode de l'invention peut être utilisée pour une étude pharmacocinétique d'amygdaline d'un extrait de plante éliminant l'hémostase.

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