C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12P 21/06 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/542 (2006.01) G01N 33/573 (2006.01)
Patent
CA 2285426
Methods and compositions for detecting molecular interactions, particularly protein-protein interactions, are provided. The invention allows detection of such interactions in living cells or in vitro. Detection of molecular interactions in living cells is not limited to the nuclear compartment, but can be accomplished in the cytoplasm, cell surface, organelles, or between these entities. In one embodiment, the method utilizes novel compositions comprising fusion proteins between the molecules of interest and two or more inactive, weakly-complementing .beta.-galactosidase mutants. Association between the molecules of interest brings the complementing .beta.- galactosidase mutants into proximity so that complementation occurs and active .beta.-galactosidase is produced. The active .beta.-galactosidase may be detected by methods well-known in the art. Among the uses of the invention are the study of protein-protein interactions, functional genomics, agonist and antagonist screening and drug discovery.
Cette invention se rapporte à des procédés et à des compositions pour détecter des interactions moléculaires, en particulier des interactions entre protéines. Cette invention permet la détection de ces interactions dans des cellules vivantes ou in vitro. La détection d'interactions moléculaires dans des cellules vivantes n'est pas limitée à la région du noyau mais peut être effectuée dans le cytoplasme, à la surface de la cellule, dans les organelles ou entre ces entités. Dans un mode de réalisation, ledit procédé utilise des nouvelles compositions comprenant des protéines de fusion entre les molécules d'intérêt et au moins deux mutants de .beta.-galactosidase à faible complémentation inactifs. L'association entre les molécules d'intérêt amène les mutants de .beta.-galactosidase de complémentation à proximité les uns des autres, pour que la complémentation ait lieu et pour que la .beta.-galactosidase active soit produite. La .beta.-galactosidase active peut être détectée par des procédés bien connus. Parmi les utilisations de cette invention, on peut citer l'étude des interactions entre protéines, la génomique fonctionnelle, le criblage d'agonistes et d'antagonistes et la recherche de médicaments.
Blau Helen M.
Mohler William
Rossi Fabio
Gowling Lafleur Henderson Llp
The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1449860