C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2759992
The present invention relates to a method for amplifying and detecting nucleic acid sequences in a reaction cartridge comprising the following steps, (i) providing a sample comprising at least one nucleic acid molecule, (ii) in a first reaction chamber of the cartridge providing reagents for an amplification reaction, (iii) mixing the sample with the amplification reagents, (iv) amplifying the at least one nucleic acid in the first reaction chamber of the cartridge, (v) transferring at least parts of the amplification reaction into a second and third reaction chamber of the cartridge each comprising a probe set, wherein (a) each probe set consists of at least three probes, (b) each of the probes is specific for a nucleic acid sequence, (c) there are at least two probes in each set which carry an identical label, (d) each of the probes in a given probe set that carries an identical label has a melting temperature (Tm) which differs by more than 2°C from the other probe in said probe set with the same label, (e) wherein the probes carrying the identicai label differ in melting temperature (Tm) in a way that they are distinguishable by melting point, (f) performing a melting point analysis in order to determine which of the probes has specifically bound a nucleic acid.
Cette invention concerne un procédé d'amplification et de détection de séquences d'acide nucléique dans une colonne (cartouche) de réaction, ledit procédé consistant à (i) fournir un échantillon comprenant au moins une molécule d'acide nucléique, (ii) dans une première chambre réactionnelle de la colonne, introduire des réactifs pour une réaction d'amplification, (iii) mélanger l'échantillon avec les réactifs d'amplification, (iv) amplifier ledit acide nucléique dans la première chambre réactionnelle de la colonne, (v) transférer au moins certaines parties de la réaction d'amplification dans une seconde chambre et une troisième chambre de la colonne, chacune comprenant un groupe de sondes, (a) chaque groupe de sondes étant constitué d'au moins trois sondes, (b) chacune des sondes étant spécifique d'une séquence d'acide nucléique, (c) au moins deux sondes de chaque groupe portant un marqueur identique, (d) chacune des sondes d'un groupe donné de sondes à marqueur identique ayant une température de fusion (Tm) différant de plus de 2 °C de l'autre sonde dudit groupe de sondes à marqueur identique, (e) les sondes portant le marqueur identique ayant une température de fusion (Tm) différente qui les fait distinguer les unes des autres par leur point de fusion, (f) une analyse des points de fusion permettant de déterminer quelle sonde s'est liée spécifiquement à un acide nucléique.
Dahlke Rainer
Engel Holger
Himmelreich Ralf
Rothmann Thomas
Wende Andy
Qiagen Gmbh
Smart & Biggar
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1712197