Detection of purine and pyrimidine nucleotides and...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 27/26 (2006.01) G01N 27/48 (2006.01) G01N 27/49 (2006.01)

Patent

CA 2291034

Sinusoidal voltammetry was employed to detect both purine and pyrimidine-based nucleic acids. Adenine and cytosine, representing these two classes of nucleic acids, could be detected with nanomolar detection limits at a copper electrode under these conditions, where the sensitivity for adenine was much higher than that for cytosine. Detection limits for purine-containing nucleotides (e.g., adenosine 5'-monophosphate (AMP), adenosine 5'-diphosphate (ADP), and adenosine 5'-triphosphate (ATP)) were on the order of 70-200 nM using this method. These detection limits are achieved for native nucleotides and are over two orders of magnitude lower than those found with UV absorbance detection. Pyrimidine-based nucleotides could also be detected with high sensitivity due to the presence of a sugar backbone which is electroactive at the copper surface.

La voltamétrie sinusoïdale a été utilisée pour détecter des acides nucléiques à base de purine et de pyrimidine. L'adénine et la cytosine, représentant ces deux classes d'acide nucléique, pouvaient être détectées avec des seuils de détection nanomolaires au niveau d'une électrode de cuivre dans les conditions décrites où la sensibilité à l'adénine était considérablement supérieure à celle de la cytosine. Les seuils de détection des nucléotides à base de purine (par exemple, l'adénosine-5'-monophosphate (AMP), l'adénosine-5'-diphosphate (ADP) et l'adénosine-5'-triphosphate (ATP)) déterminés selon cette méthode étaient de l'ordre de 70 à 200 nM. Ces seuils de détection sont obtenus pour les nucléotides natifs et présentent un ordre de grandeur plus de deux fois inférieur à celui des seuils obtenus par la méthode de détection à absorbance UV. Les nucléotides à base de pyrimidine peuvent également être détectés avec grande précision du fait de la présence d'une squelette sucre électroactive à la surface de cuivre.

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