B - Operations – Transporting – 01 – F
Patent
B - Operations, Transporting
01
F
B01F 3/04 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
Patent
CA 2567324
An apparatus and a method for isolating a biologic product, such as plasmid DNA, from cells. The method involves lysing cells in a controlled manner separate insoluble components from a fluid lysate containing cellular components of interest, followed by membrane chromatographic techniques to purify the cellular components of interest. The process utilizes a unique lysis apparatus, ion exchange and, optionally, hydrophobic interaction chromatography membranes in cartridge form, and ultrafiltration. The process can be applied to any biologic product extracted from a cellular source. The process uses a lysis apparatus, including a high shear, low residence-time mixer for advantageously mixing a cell suspension with a lysis solution, a hold time that denatures impurities, and an air-sparging bubble mixer that gently yet thoroughly mixes lysed cells with a neutralization/precipiation buffer and floats compacted precipitated cellular material.
L'invention concerne un appareil et un procédé d'isolement d'un produit biologique, tel que l'ADN plasmidique, à partir de cellules. Le procédé consiste à lyser des cellules de façon contrôlée, pour séparer des constituants insolubles d'un lysat liquide contenant des constituants cellulaires d'intérêt, après quoi des techniques de chromatographie membranaire sont mises en oeuvre pour purifier les constituants cellulaires d'intérêt. Le procédé de l'invention met en oeuvre un appareil à lyser unique, un échange d'ions et, éventuellement, des membranes chromatographiques d'interaction hydrophobes sous forme de cartouche, ainsi qu'une ultrafiltration. Le procédé de l'invention peut être appliqué à n'importe quel produit biologique extrait d'une source cellulaire. Le procédé met en oeuvre un appareil à lyser comprenant un agitateur à cisaillement élevé et faible temps de séjour pour agiter avantageusement une suspension cellulaire avec une solution de lyse; un temps de prise qui dénature les impuretés; et un agitateur à bulles à injection d'air qui agite doucement mais de façon homogène des cellules lysées à l'aide d'un tampon de neutralisation/précipitaation, et laisse flotter le matériau cellulaire précipité compacté.
Darnell Jeff
Gonzalez Hugo
Hebel Henry
Ramakrishnan Sriram
Advisys Inc.
Kirby Eades Gale Baker
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1989086