Diagnostic and screening methods and kits associated with...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/53 (2006.01) C12Q 1/37 (2006.01)

Patent

CA 2570959

Methods and kits for assessing proteolytic enzyme activity and a modulator~s effect thereof employ a Ubiquitin or Ubiquitin-like Protein and a signal producing structure. The corresponding fusion polynucleotide is employed for production of transgenic cells, plants and animals that may be produced by stably transfection, optionally transforming the cell, plant or animal with a Ubiquitin-,UBL-or their C-terminal binding functional fragment-Reporter fusion polynucleotide. A method of diagnosing a disease or condition, comprises contacting or administering a sample obtained from a subject suspected of being afflicted with the disease or condition with the cell, plant or animal, detecting any signal produced by the reporter in the presence of the sample and comparing the signal to controls for 0% and 100% signals.

L'invention concerne des méthodes et des trousses pour évaluer une activité enzymatique protéolytique et un effet modulateur de celle-ci, au moyen d'une protéine d'ubiquitine ou analogue à l'ubiquitine et d'une structure de production de signal. Le polynucléotide hybride correspondant est utilisé pour produire des cellules, des végétaux et des animaux transgéniques pouvant être produits par une transfection stable, éventuellement transformant la cellule, le végétal ou l'animal, au moyen d'un polynuclélotide hybride à rapporteur de fragment fonctionnel de liaison d'ubiquitine, d'UBL ou de son C-terminal. L'invention concerne une méthode de diagnostic d'une maladie ou d'un trouble. Cette méthode consiste à mettre en contact ou à administrer un échantillon obtenu à partir d'un prélèvement sur un patient censé souffrir d'une maladie ou d'un trouble présentant la cellule, le végétal ou l'animal susmentionnés, à détecter tout signal produit par le rapporteur, en présence de l'échantillon, et à comparer le signal par rapport à des témoins pour des signaux 0 % et 100 %.

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