Diagnostic method and kit for neuropsychiatric diseases...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2287878

There are disclosed a diagnostic method and kits for SCAIII syndrome. The method comprises attaching a portion of SCAIII gene containing copies of 73 trinucleotide (CAG) repeat units to a substrate; amplifying a DNA segment containing copies of the trinucleotide repeat units from the genomic DNA of a testee using two labeled primers under the suitable condition for carrying out polymerase chain reaction (PCR); hybridizing the gene with the PCR product by amplifying DNA segment; and analyzing the results of the hybridization. A SCAIII patient can be effectively diagnosed by examining the increase extent of the number of the TNR characteristic of the disease-associated gene with the aid of reverse dot hybridization technique or PCR-MPH. Useful for the diagnosis is a kit which comprises the substrate, two primers with a detectable label, which are used to amplify a DNA segment containing copies of the trinucleotide repeat unit from the genomic DNA of a testee, a buffer and a polymerase for polymerase chain reaction, a buffer for gene hybridization and an enzyme for color detection.

L'invention concerne une méthode diagnostique et des kits destinés au syndrome SCAIII. Cette méthode consiste à fixer à un substrat une partie d'un gène de SCAIII contenant des copies de 73 unités de répétition transnucléotidique (CAG); à amplifier un segment d'ADN contenant des copies de ces unités de répétition transnucléotidique (TNR) à partir de l'ADN génomique d'un sujet en utilisant deux amorces marquées, dans des conditions adéquates pour réaliser une amplification en chaîne par polymérase (ACP); à hybrider ce gène avec le produit d'ACP par amplification d'un segment d'ADN; et à analyser les résultats de l'hybridation. On peut efficacement diagnostiquer la SCAIII chez un patient en examinant l'importance de l'augmentation du nombre des caractéristiques TNR du gène associé à la maladie, à l'aide d'une technique d'hybridation inverse ponctuelle ou ACP-MPH. Le kit, utile pour le diagnostic, comporte le substrat, deux amorces avec une marque détectable servant à amplifier le segment d'ADN contenant des copies de l'unité de répétition transnucléotidique à partir de l'ADN génomique d'un sujet, un tampon et une polymérase d'ACP, un tampon pour l'hybridation génique et une enzyme pour la détection colorimétrique.

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