Diagnostic tests and kits for clostridium difficile

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/573 (2006.01) G01N 33/577 (2006.01) C07K 16/12 (2006.01) C07K 16/40 (2006.01) C12Q 1/32 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2285919

This invention provides method, compositions, and kits for detecting the presence of toxigenic strains of C. difficile in a biological sample. One embodiment provides methods for C. difficile detection that involve assaying for both C. difficile glutamate dehydrogenase and C. difficile toxin A or toxin B. In another embodiment, the invention provides a highly sensitive assay for C. difficile toxin A that is useful for determining whether a C. difficile strain is toxigenic. This embodiment involves binding of toxin A to a moiety that reversibly binds to capture moiety present on a magnetic bead. A magnetic field is applied to the sample to concentrate the toxin A, after which the magnetic beads are dissociated and removed from the solution to obtain a highly concentrated preparation of toxin A, thus making possible a very sensitive assay.

L'invention concerne des méthodes, des compositions, et des trousses qui permettent de déceler la présence de souches toxicogènes de C. difficile dans un prélèvement biologique. Dans une forme de réalisation, les méthodes de détection de C. difficile consistent en des dosages pouvant dépister une glutamate déhydrogénase de C. difficile et la toxine A ou toxine B de C. difficile. Dans une forme de réalisation différente, ces méthodes consistent en un dosage très sensible qui permet de dépister la toxine A de C. difficile, et de déterminer efficacement si une souche de C. difficile est toxicogène; elles consistent en outre à lier la toxine A à une fraction qui se lie de manière réversible à une fraction en captivité présente sur une bille magnétique. Un champ magnétique est appliqué sur le prélèvement pour concentrer la toxine A, après quoi les perles magnétiques sont séparées et extraites de la solution pour donner une préparation de toxine A très concentrée, ce qui permet d'obtenir un dosage très sensible.

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