Dioxetane labeled probes and detection assays employing the...

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – J

Patent

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Details

C07J 1/00 (2006.01) C07D 321/00 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C07K 14/00 (2006.01)

Patent

CA 2275144

Probes labeled with 1,2-dioxetane precursors can be employed in a variety of assays. The probes may be nucleic acid, peptide nucleic acid, proteins including enzyme, antibody or antigen, steroid, carbohydrate, drug or non-drug hapten. The probe is provided with a 1,2-dioxetane precursor bound thereto, generally either covalently, or a strong ligand bond. The dioxetane precursor moiety is converted to a bound 1,2-dioxetane by exposure to singlet oxygen. The dioxetane (labels) either spontaneously decompose, or are induced to decompose by an appropriate trigger to release light. The trigger may be a change in pH temperature, or an agent which removes a protective group. Assay formats in which these 1,2-dioxetane labeled probes and referents may be used to include hybridization assays, immuno assays, gel-based assays and Capillary Zone Electrophoresis.

L'invention concerne des sondes marquées par des précurseurs de 1,2-dioxétane qui peuvent être utilisées dans divers dosages. Ces sondes peuvent être de l'acide nucléique, de l'acide nucléique de peptide, des protéines comprenant un enzyme, un anticorps ou un antigène, un stéroïde, de l'hydrate de carbone, un haptène formant médicament ou non. La sonde est pourvue d'un précurseur de 1,2-dioxétane liée à cette dernière, généralement, par covalence, ou une forte liaison aux ligands. La fraction de précurseur de dioxétane est convertie en 1,2-dioxétane liée par exposition à l'oxygène singulet. Ces marqueurs de dioxétane se décomposent spontanément ou on induit leur décomposition par un déclencheur approprié pour générer de la lumière. Le déclencheur peut être un changement de pH, de température, ou un agent qui supprime un groupe de protection. Les formats d'analyse dans ces sondes marquées au 1,2-dioxétane et référents peuvent être utilisés pour comprendre des dosages par hybridation, des dosages immunologiques, des dosages sur gel et des électrophorèses de zone sur colonne capillaire.

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