Direct fluorescene immunoassay for viral antigens

Details Direct fluorescene immunoassay for viral antigens Direct fluorescene immunoassay for viral antigens

G - Physics

01

N

G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)

Patent

CA 2758939

The present invention describes a liq-uid direct fluorescence antibody assay that is rapid and sensitive to detect respiratory virus in infected cells. The assay includes centrifugation of the speci-men, incubation of sample and reagents in solution, and detection of the absence or presence of respira-tory virus. Sapogenin is used as a detergent to per-meabilize the cells for entry of the monoclonal anti-bodies to react with intracellular antigens. The cells are stained with fluorescently labeled monoclonal antibodies against the viral antigens along with a background stain and a fluorescent nuclear stain. This counter staining decreases background and al-lows co-localization of antigen and nuclear struc-tures for enhanced detection.

La présente invention décrit une analyse par anticorps par fluorescence directe liquide qui est rapide et sensible pour détecter un virus respiratoire dans des cellules infectées. Cette analyse comprend la centrifugation de l'échantillon, l'incubation de l'échantillon et de réactifs en solution, et la détection de l'absence ou de la présence d'un virus respiratoire. La sapogénine est utilisée en tant que détergent pour perméabiliser les cellules pour faire entrer les anticorps monoclonaux afin de réagir avec des antigènes intracellulaires. Les cellules sont colorées par des anticorps monoclonaux colorés par fluorescence dirigés contre des antigènes viraux ainsi que par une coloration d'arrière-plan et une coloration nucléaire fluorescente. Cette coloration de contraste diminue l'arrière-plan et permet une co-localisation de l'antigène et des structures nucléaires pour une détection améliorée.

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