Direct gene transfer into the ruminant mammary gland

Details Direct gene transfer into the ruminant mammary gland Direct gene transfer into the ruminant mammary gland

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/87 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) A23C 9/00 (2006.01) C07K 14/61 (2006.01) C12N 9/38 (2006.01) C12N 9/72 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12N 15/86 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2210897

Disclosed is a method for expressing a heterologous gene in the mammary gland of a ruminant mammal. The invention is useful for producing a heterologous protein(s) in the milk of the mammal, for producing a heterologous enzyme(s) which is tethered to the mammary epithelial cell membrane and which can act on a component of the milk of the mammal, and for providing an antisense oligonucleotide(s) or ribozyme(s) which inhibits expression of a gene to a mammary epithelial cell. The method involves infusing a liquid complex including a genetic construct into a ductal tree of the mammal. The liquid complex can be infused before the mammal reaches sexual maturity and after the mammal develops a functional steak canal. Alternatively, a liquid complex that is free of live retroviruses can be infused. If desired, the infused genetic construct can be treated with a polycationic compound and/or a lipid to improve the efficiency with which it is taken up by an epithelial cell of the mammary gland.

On décrit un procédé d'expression d'un gène hétérologue dans la glande mammaire d'un mammifère ruminant. L'invention est utile pour produire une ou des protéines hétérologues dans le lait du mammifère, pour produire une ou des enzymes hétérologues qui sont fixées à la membrane des cellules épithéliales de la mamelle et qui peuvent agir sur un composant du lait du mammifère, ou pour produire un ou des oligonucléotides ou des ribozymes antisens inhibant l'expression d'un gène dans les cellules épithéliales de la mamelle. Le procédé fait appel à une perfusion d'un complexe liquide comprenant un produit de recombinaison génétique, dans l'arbre des canaux galactophores du mammifère. Le complexe liquide peut être injecté avant que le mammifère n'atteigne la maturité sexuelle et après qu'il a développé les canaux des trayons fonctionnels. On peut également injecter un complexe liquide exempt de rétrovirus vivants. Lorsque cela est souhaité, le produit de recombinaison génétique injecté peut être traité avec un composé polycationique et/ou un lipide pour améliorer l'efficacité avec laquelle il est absorbé par les cellules épithéliales de la glande mammaire.

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