C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/80 (2006.01)
Patent
CA 2630455
We have discovered DNA binding sites which are specifically recognized by PrtT, a transcriptional activator for protease genes. The DNA binding site can be defined structurally by a consensus nucleotide sequence and functionally by PrtT's ability to regulate transcriptional activation through that sequence. Both PrtT and its cognate DNA binding site (i.e., the nucleotide sequence in each promoter that is recognized by PrtT) can be used in a gene expression system. Possession of only a PrtT transcriptional activator is insufficient, its cognate DNA binding site is necessary for recognition by PrtT (i.e., binding to the site and activating transcription under appropriate conditions). A functional site, such as one obtained from a wild-type fungal gene, will confer PrtT- dependent transcriptional activation on 3'-downstream sequences. A mutation of a wild- type promoter that results in a non- functional site will abolish PrtT-dependent transcriptional activation of 3'- downstream sequences. A mutation of a wild-type promoter that results in a more functional site will enhance PrtT-dependent transcriptional activation of 3'-downstream sequences.
L'on a découvert des sites de liaison à l'ADN reconnus spécifiquement par PrtT, un activateur transcriptionnel pour les gènes protéase. Le site de liaison à l'ADN peut être défini du point de vue structurel par une séquence nucléotidique consensus, et du point de vue fonctionnel par la capacité de PrtT de réguler l'activation transcriptionnelle à travers cette séquence. Tant PrtT que son site de liaison à l'ADN parent (c.-à-d. la séquence nucléotidique présente dans chaque promoteur reconnu par PrtT) peuvent être utilisés dans un système d'expression génétique. La présence du seul activateur transcriptionnel de PrtT n'est pas suffisante; celle de son site de liaison à l'ADN parent est nécessaire pour la reconnaissance de PrtT (c.-à-d. la liaison au site et l'activation de la transcription dans des conditions appropriées). Un site fonctionnel, tel qu'un site obtenu d'un gène fongique de type sauvage, conférera une activation transcriptionnelle dépendante de PrtT à des séquences aval de l'extrémité 3'. Une mutation du promoteur de type sauvage produisant un site non fonctionnel supprimera l'activation transcriptionnelle dépendante de PrtT de séquences aval de l'extrémité 3'. Une mutation du promoteur de type sauvage produisant un site plus fonctionnel renforcera l'activation transcriptionnelle dépendante de PrtT de séquences aval de l'extrémité 3'.
Parenicova Lucie
Peij Van Noel Nicolaas Maria Elisabeth
Dsm Ip Assets B.v.
Smart & Biggar
LandOfFree
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