C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/54 (2006.01) C12N 9/12 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01)
Patent
CA 2156176
A DNA polymerase having an amino acid sequence comprising substantially the same amino acid sequence as that of Thermus aquaticus or Thermus flavus DNA polymerase, excluding the N-terminal 280 amino acid residues of Thermus aquaticus DNA polymerase or the N-terminal 279 amino acid residues of Thermus flavus DNA polymerase, recombinant DNA sequences encoding said DNA polymerases, vectors comprising said DNA sequences, and host cells containing such vectors. A formulation of thermostable or other DNA polymerases comprising a majority component comprised of at least one thermostable or other DNA polymerase of the type described above, wherein the DNA polymerase lacks 3'-exonuclease activity, and a minority component comprised of at least one thermostable DNA polymerase exhibiting 3'-exonuclease activity, and an improved method for enzymatic extension of DNA strands, especially while, but not limited to, amplifying nucleic acid sequence by polymerase chain reaction wherein the above formulation is made and used to catalyse primer extension, are also provided.
L'invention concerne une ADN polymérase comprenant une séquence d'aminoacides contenant pratiquement la même séquence d'aminoacides que l'ADN polymérase de Thermus aquaticus ou Thermus flavus, à l'exclusion des 280 restes aminoacides N-terminaux de l'ADN polymérase de thermus aquaticus ou des 279 restes aminoacides N-terminaux de l'ADN polymérase de Thermus flavus, des séquences d'ADN de recombinaison codant lesdites ADN polymérases, des vecteurs comprenant lesdites séquences d'ADN, et des cellules hôtes contenant ces vecteurs. L'invention porte également sur une formule d'ADN polymérases thermostables ou autres comportant un composant majoritaire constitué d'au moins une ADN polymérase thermostable ou autre du type décrit ci-dessus, l'ADN polymérase ne présentant aucune activité de 3'-exonucléase, et un composant minoritaire constitué d'au moins une ADN polymérase présentant une activité de 3'-exonucléase. L'invention se rapporte également à un procédé perfectionné d'extension enzymatique des brins d'ADN, pour, entre autres, amplifier les séquences d'acides nucléiques par PCR, la formule sus-mentionnée étant conçue et utilisée pour catalyser l'extension d'amorce.
Barnes Wayne M.
Sim & Mcburney
Takara Bio Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1528201