Efficient linking of nucleic acid segments

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2303420

Gene segment linking provides a simple, cost-effective way to produce an amplified DNA sequence containing linked segments of a single gene or multiple genes. The inventive method involves Multiplex PCR amplifications of gene sequences and linkage of the exons in a single reaction. Multiplex PCR of the gene segments is performed with primers having complementary tails which permit linkage of the gene segments and amplification of the linked gene in one polymerase chain reaction. The ability to construct an amplified DNA from genomic DNA containing several introns in two PCR steps allows the rapid production of DNA which heretofore required many time-consuming and expensive steps.

Une liaison de segment de gène constitue un moyen simple et économique de produire une séquence d'ADN amplifiée contenant des segments liés d'un gène unique ou de gènes multiples. La méthode selon l'invention concerne des amplifications en chaîne par polymérase multiplex de séquences de gènes et la liaison des exons dans une réaction unique. On effectue l'amplification en chaîne par polymérase multiplex des segments de gènes avec des amorces possédant des queues complémentaires permettant une liaison des segments de gènes et une amplification du gène lié dans une réaction en chaîne par polymérase unique. La capacité de construire un ADN amplifié à partir d'un ADN génomique contenant plusieurs introns en deux phases d'amplification en chaîne par polymérase permet la production rapide d'ADN, opération qui, jusqu'ici, nécessitait des phases longues et coûteuses.

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