Electrochemiluminescent enzyme immunoassay

Details Electrochemiluminescent enzyme immunoassay Electrochemiluminescent enzyme immunoassay

G - Physics

01

N

G01N 33/53 (2006.01) C07F 15/00 (2006.01) C07K 16/44 (2006.01) G01N 21/66 (2006.01) G01N 21/76 (2006.01)

Patent

CA 2223027

Electrochemiluminescent-labels and enzyme substrates, which preferably are conjugated, are used in immunoassays and electrochemiluminescence is generated catalytically. In conventional electrochemiluminescence immunoassays, an anti- analyte antibody molecule can give rise to typically 6-8 electrochemiluminescence-active ruthenium atoms, while in the present invention, each enzyme-labeled anti-analyte molecule can give rise to thousands of electrochemiluminescence-active ruthenium atoms per second. An exemplary immunoassay is based on a catalytic process employing lactamase- conjugated anti-analytes which enzymatically hydrolyze electrochemiluminescent- labeled substrates, making them strongly electrochemiluminescent. The electrochemiluminescence signal generated by each anti-analyte molecule (i.e., each analyte molecule) is much greater than with the conventional method. Accordingly, greater sensitivity can be gained in the measurement of low concentrations of a given immunoassay analyte.

Des marqueurs électrochimioluminescents et des substrats d'enzymes, de préférence conjugués, sont utilisés dans des dosages immunologiques et l'électrochimioluminescence est produite par voie catalytique. Dans les dosages immunologiques classiques par électrochimioluminescence, une molécule d'anticorps anti-analyte peut provoquer l'apparition, dans un cas typique, de 6 à 8 atomes de ruthénium électrochimioluminescents, tandis que, dans la présente invention, chaque molécule d'anticorps anti-analyte marquée par une enzyme peut provoquer l'apparition de milliers d'atomes de ruthénium électrochimioluminescents par seconde. Un dosage immunologique caractéristique a pour base un processus catalytique qui emploie des molécules d'anticorps anti-analyte conjugués à la lactamase, qui hydrolysent par voie enzymatique les substrats marqués par électrochimioluminescence, les rendant fortement électrochimioluminescents. Le signal d'électrochimioluminescence produit par chaque molécule d'anticorps anti-analyte (c'est-à-dire chaque molécule d'analyte) est beaucoup plus fort que celui produit avec le procédé classique. En conséquence, on peut obtenir une plus grande sensibilité de mesure de faibles concentrations d'un analyte donné dans un dosage immunologique.

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