C - Chemistry – Metallurgy – 12 – M
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
M
C12M 3/00 (2006.01) C12N 15/87 (2006.01)
Patent
CA 2344325
An electroporation method and apparatus generating and applying an electric field according to a user-specified pulsing and temperature profile scheme. The apparatus includes a cuvette holder with a Peltier device forming part of the electrode structures that form part of the holder. Advantageously, one such pulse includes a low voltage pulse of a first duration, immediately followed by a high voltage of a second duration, immediately followed by a low voltage of a third duration. The low voltage electroporation field accumulates molecules at the surface of a cell, the appropriately high voltage field creates an opening in the cell, and the final low voltage field moves the molecule into the cell. The molecules may be DNA, portions of DNA, chemical agents, the receiving cells may be eggs, platelets, human cells, red blood cells, mammalian cells, plant protoplasts, plant pollen, liposomes, bacteria, fungi, yeast, sperm, or other suitable cells. The molecules are placed in close proximity to the cells, either in the interstitial space in tissue surrounding the cells or in a fluid medium containing the cells.
L'invention concerne un procédé et un appareil d'électroporation, qui permet de générer et d'appliquer un champ électrique en respectant une configuration d'impulsion et de température définie par l'utilisateur. L'appareil comprend un support de cuvette doté d'un dispositif Peltier qui est intégré à des structures d'électrodes attachées audit support. Depréférence, une telle impulsion est constituée d'une impulsion basse tension d'une première durée, immédiatement suivie d'une haute tension d'une deuxième durée, elle-même immédiatement suivie d'une basse tension d'une troisième durée. Le champ d'électroporation basse tension fait s'accumuler les molécules à la surface d'une cellule, le champ haute tension créant une ouverture dans la cellule, et le champ basse tension final faisant pénétrer la molécule dans la cellule. Les molécules peuvent être de l'ADN, des portions d'ADN, des agents chimiques, les cellules receveuses pouvant être des oeufs, des thrombocytes, des cellules humaines, des érythrocytes, des cellules mamméliennes, des protoplastes de plantes, du pollen de plantes, des liposomes, des bactéries, des eumycètes, des levures, du sperme et toutes autres cellules appropriées. Les molécules sont placées au voisinage immédiat des cellules, soit dans l'espace interstitiel tissulaire entourant les cellules, soit dans un milieu fluide contenant les cellules.
Hofmann Gunter A.
Laverdiere Rejean
Nanda Gurvinder Singh
Genetronics Inc.
Oyen Wiggs Green & Mutala Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1785554