C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) C07K 14/045 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 9/12 (2006.01) C12N 9/96 (2006.01) C12N 15/38 (2006.01) C12N 15/54 (2006.01) C12N 15/72 (2006.01)
Patent
CA 2221192
A method for expressing a heterologous protein in a prokaryotic host cell, comprising the steps of: (a) providing a DNA vector having: (1) a control region operatively linked to a first genetic element encoding a carrier protein capable of expression in the host cell, and (2) a second genetic element encoding the heterologous protein, the second element being embedded within the first element such that the first and second elements are contiguous and in the same reading frame; (b) transforming the host cell with the DNA vector; and (c) expressing a fusion protein of the heterologous protein and the carrier protein, wherein the heterologous protein is joined at its N-terminus to a first domain of the carrier protein and at its C-terminus to a second domain of the carrier protein, and also a method for confirming intact expression of heterologous proteins, as well as fusion proteins, DNA constructs, plasmid vectors and transformed host cells relating to the above methods.
Procédé d'expression d'une protéine hétérologue dans une cellule hôte procaryote, comportant les étapes suivantes: a) apport d'un vecteur d'ADN présentant: 1) une région de régulation liée fonctionnellement à un premier élément génétique codant une protéine de transport susceptible d'expression dans la cellule hôte et 2) un deuxième élément génétique codant la protéine hétérologue, ce deuxième élément étant inclus à l'intérieur du premier élément de telle sorte que le premier et deuxième éléments sont contigus et se trouvent dans le même cadre de lecture; b) transformation de la cellule hôte par le vecteur d'ADN et c) expression d'une protéine de fusion de la protéine hétérologue et de la protéine de transport, la protéine hétérologue étant liée au niveau de son N-terminal à un premier domaine de la protéine de transport et au niveau de son C-terminal à un deuxième domaine de la protéine de transport. L'invention concerne également un procédé permettant de confirmer l'expression intacte de protéines hétérologues, ainsi que de protéines de fusion, d'assemblages d'ADN, de vecteurs de plasmides et de cellules hôtes transformées, relatifs aux procédés cités.
Chovan Linda E.
Maine Gregory T.
Abbott Laboratories
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l.,s.r.l./llp
LandOfFree
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