Emission quenching sensors

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 21/64 (2006.01) A61B 6/00 (2006.01) G01N 21/77 (2006.01) A61B 5/14 (1995.01)

Patent

CA 2171189

The present invention relates to a sensing instrument and method for measuring the concentration of an analyte. The sensing instrument includes a sensing element including at least a first emissive indicator characterized by a bimolecular quenching rate constant kq, one or more fluorescence lifetimes o above a lowest lifetime oL, and capable of emitting analyte concentration dependent signals when exposed to an excitation signal in the presence of quencher. An excitation system coupled to the sensing element provides an amplitude modulated excitation signal at one or more radial modulation frequencies .omega.. A detector coupled to the sensing element detects the analyte concentration dependent signals and provides detected signals. A processor, preferably including memory for storing information characterizing a calibration relationship between analyte concentration and the concentration dependent parameter is coupled to the detector. The processor univariantly processes the detected signals and provides output signals representative of analyte concentration. The sensing element and/or excitation system are configured to enable the instrument to operate sufficiently within the condition [(kq[Q])2+.omega.2]o2 >> 1+2kqo[Q] such that a slope of the relationship between the concentration dependent parameter and anlayte concentration is independent of o variability and/or heterogeneity for all analyte concentrations within the operating range and for all lifetimes o greater than oL. When configured in this manner the calibration slope is independent of o variability and/or heterogeneity. The sensor can therefore be recalibrated by modifying the stored calibration information characterizing the intercept, but not the slope, of the relationship in response to sensing element exposure to one calibration analyte of a known concentration.

L'invention concerne un instrument de détection et un procédé servant à mesurer la concentration d'un analyte. L'instrument de détection comprend un élément de détection comportant au moins un premier indicateur d'émission caractérisé par une constante de vitesse d'extinction bimoléculaire K¿q? d'une ou plusieurs durées de vie de fluorescence ?¿o? au-dessus d'une durée de vie la plus basse ?¿oL?, et pouvant émettre des signaux dépendant de la concentration d'analyte quand il est exposé à un signal d'excitation en présence de l'agent d'extinction. Un système d'excitation couplé à l'élément de détection produit un signal d'excitation modulé en amplitude à une ou plusieurs fréquences de modulation radiale .omega.. Un détecteur couplé à l'élément de détection détecte les signaux dépendant de la concentration d'analyte et produit des signaux détectés. Un processeur comprenant, de préférence, une mémoire servant à mémoriser les informations caractéristiques d'un rapport rapport d'étalonnage entre la concentration de l'analyte et le paramètre dépendant de la concentration est couplé au détecteur. Le processeur traite de façon univariante les signaux détectés et produit des signaux de sortie représentant la concentration de l'analyte. L'élément de détection et/ou le système d'excitation sont conçus pour permettre à l'instrument de fonctionner suffisamment dans le cadre de la condition [(k¿q?[Q]?2¿+.omega.?2¿]?¿o??2¿ >> 1+2k¿q??¿o?[Q], de telle manière qu'une pente du rapport entre le paramètre dépendant de la concentration et la concentration de l'analyte est indépendante de la caractéristique variable et/ou hétérogène de ?¿o? pour toutes les concentrations d'analyte se situant dans la plage opérationnelle et pour toutes les durées de vie ?¿o? supérieures à ?¿oL?. Quand elle est configurée de cette façon, la pente d'étalonnage est indépendante de la caractéristique variable et/ou hétérogène de ?¿o?. On peut, de ce fait, réétalonner le détecteur par modification de l'information d'étalonnage mémorisée caractérisant la coordonnée d'origine, mais non la pente, du rapport en réaction à l'exposition de l'élément de détection à un analyte d'étalonnage de concentration connue.

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