Endogenous gene expression modification with regulatory element

Details Endogenous gene expression modification with regulatory element Endogenous gene expression modification with regulatory element

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/67 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01)

Patent

CA 2071989

Normally transcriptionally silent genes in a cell line or microorganism may be activated for expression by inserting a DNA regulatory element which is capable of promoting the expression of a normally expressed gene product in that cell or which is promiscuous the regulatory element being inserted so as to be operatively linked with the normally silent gene in question. The insertion is accomplished by means of homologous recombination by creating a DNA construct including a segment having a DNA segment of the normally silent gene (targeting DNA) and the DNA regulatory element to induce gene transcription. The technique is also used to modify the expression characteristics of any endogenous gene of a given cell line or microorganism.

On peut activer l'expression par des gènes n'intervenant normalement pas dans une transcription dans une lignée cellulaire ou dans des mircroorganismes, par insertion d'un élément régulateur d'ADN, lequel est capable de promouvoir l'expression d'un produit génétique normalement exprimé dans cette cellule, ou lequel est sujet à promiscuité, l'élément régulateur étant inséré de manière à être fonctionnellement lié au gène normalement inactif en question. L'insertion s'effectue au moyen d'une recombinaison homologue par création d'une structure d'ADN comprenant un segment présentant un segment d'ADN du gène normalement inactif (ADN de ciblage) et l'élément régulateur d'ADN, afin d'induire une transcription génétique. On utilise également la technique afin de modifier les caractéristiques d'expression de n'importe quel gène endogène d'une lignée cellulaire ou d'un microorganisme donné.

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