C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/31 (2006.01) A23J 3/16 (2006.01) A23J 3/18 (2006.01) C07K 14/38 (2006.01) C12N 1/15 (2006.01) C12N 9/62 (2006.01) C12P 21/06 (2006.01)
Patent
CA 2263947
The present invention has for object a koji mold which is capable to express at least 2 times more endo- and exo-peptidases than the wild type strain Aspergillus oryzae CNCM I-1882, and especially at least 30 mU of endopeptidase activity, at least 30 mU of leucine-amino-peptidase activity and at least 10 mU of prolyldieptidyl-peptidase activity per ml of supernatant when grown in a minimal medium containing 0.2 % soy bean proteins. The invention also provides a DNA-binding protein of Aspergillus oryzae (AREA) having at least the amino- acid sequence from amino-acid 1 to amino-acid 731 of SEQ ID NO:2 or functional derivatives thereof. The invention also provides a DNA molecule that comprises an areA gene encoding the DNA-binding protein according to the invention. In a fourth aspect, the invention provides a method for over-producing proteolytic enzymes, comprising cultivating a koji mold according to the invention in a suitable growth medium under conditions that the mold expresses enzymes, and optionally isolating the enzymes in the form of a concentrate. In another aspect, the invention provides the use of the koji mold of the invention to hydrolyze protein-containing materials. In a last further aspect, the invention provides a food product comprising a protein hydrolysate obtainable by fermentation with a koji mold of the invention of a material comprising proteins and at least 5mM of L-glutamine.
L'invention concerne une moisissure de koji capable d'exprimer au moins deux fois plus d'endo- et d'exopeptidases que la souche de type sauvage Aspergillus oryzae CNCM-I-1882, et, particulièrement, au moins 30 mU d'activité d'endopeptidase, au moins 30 mU d'activité de leucine-amino-peptidase et au moins 10 mU d'activité de prolyle-dipeptidyle-peptidase par ml de surnageant quand on la cultive dans un milieu minimum contenant 0,2 % de protéines de soja. Elle concerne également une protéine de liaison à l'ADN d'Aspergillus oryzae (AREA) possédant au moins la séquence d'acides aminés de 1 à 731 de SEQ ID NO:2 ou ses dérivés fonctionnels. Elle concerne également une molécule d'ADN comprenant un gène areA codant la protéine de liaison à l'ADN. Dans un quatrième aspect, elle concerne un procédé de surproduction d'enzymes protéolytiques, ce qui consiste à cultiver une moisissure de koji dans un milieu de culture approprié dans des conditions permettant à la moisissure d'exprimer des enzymes, et, éventuellement, à isoler ces enzymes sous forme d'un concentré. Dans un autre aspect, elle concerne la mise en application de la moisissure de koji afin d'hydrolyser des matériaux contenant des protéines. Dans un autre dernier aspect, elle concerne un produit alimentaire contenant un hydrolysat protéiné qu'on obtient par fermentation avec une moisissure de koji d'un matériau composé de protéines et d'au moins 5mM de L-glutamine.
Affolter Michael
Van Den Broek Peter
Borden Ladner Gervais Llp
Societe Des Produits Nestle S.a.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2090915