Enhanced nucleic acid amplification process

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P

Patent

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Details

C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2065003

This invention relates to an improved process for amplifying a specific nucleic acid sequence. The process involves synthesizing single-stranded RNA, single-stranded DNA and double-stranded DNA. The single-stranded RNA is a first template for a first primer, the single-stranded DNA is a second template for a second primer, and the double stranded DNA is a third template for synthesis of a plurality of copies of the first template. A sequence of the first primer or the second primer is complementary to a sequence of the specific nucleic acid and a sequence of the first primer or the second primer is homologous to a sequence of the specific nucleic acid. The amplification process may be used to increase the quantity of a specific nucleic acid sequence to allow detection, or to increase the purity of a specific nucleic acid sequence as a substitute for conventional cloning methodology.

Le présent brevet porte sur un processus amélioré d'amplification d'une séquence particulière d'acide nucléique. Ce processus comporte la synthèse d'un ARN monocaténaire, d'un ADN monocaténaire et d'un ADN double brin. L'ARN monocaténaire est une première matrice pour une première amorce, l'ADN monocaténaire est une deuxième matrice pour une deuxième amorce, et l'ADN double brin est une troisième matrice servant à la synthèse de plusieurs copies de la première matrice. Une séquence de la première ou de la deuxième amorce est complémentaire à une séquence de l'acide nucléique spécifique et une séquence de la première ou de la deuxième amorce est homologue à une séquence de l'acide nucléique particulier. L'amplification peut être utilisée pour augmenter la quantité d'une séquence particulière de l'acide nucléique pour permettre la détection, ou pour augmenter la pureté d'une séquence particulière d'acide nucléique comme substitut à une méthode de clonage classique.

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