Enhancing vegetative protein production in transgenic plants...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/82 (2006.01)

Patent

CA 2607678

In various embodiments, the invention provides expression systems for heterologous protein expression in vegetative plant tissues, utilizing plant seed gene components that are adapted to orchestrate high levels of vegetative protein production. The expression systems may include host plant cells having recombinant genomes, and the plant cells may be maintained under protein expressing conditions, for example in tissue culture. The cells may be induced to express an ABD transcription factor, for example by transformation with a vector having a constitutive ABB expression cassette. The recombinant sequences in operative linkage may include an integrated expression promoter responsive to the ABI3 transcription factor, such as an arcelin gene promoter, a vicilin gene promoter and a napin gene promoter. A 5' untranslated region may include a region of an ABA responsive plant seed gene or an AB 13 responsive plant seed gene. A plant secretion signal peptide coding sequence may be included. An integrated heterologous protein coding region, encoding a recombinant protein, may be provided in an open reading frame with the signal peptide coding sequence. A 3' untranslated region may be provided having a polyadenylation signal.

Dans divers modes de réalisation, cette invention concerne des systèmes d'expression destinés à l'expression de protéines hétérologues dans des tissus de plantes végétatives, utilisant des composants de gène de semence de plantes conçus de manière à répartir des niveaux élevés de production de protéines végétatives. Les systèmes d'expression peuvent contenir des cellules de plantes hôtes comportant des génomes recombinants et ces cellules de plantes peuvent être maintenues dans des conditions d'expression de protéines, par exemple dans une culture de tissus. Les cellules peuvent être induites afin d'exprimer un facteur de transcription ABB, par exemple par transformation avec un vecteur possédant une cassette d'expression ABB constitutive. Les séquences recombinantes en liaison fonctionnelle peuvent inclure un promoteur d'expression intégré réagissant au facteur de transcription AB13, tel qu'un promoteur de gène d'arceline, un promoteur de gène de viciline et un promoteur de gène de napine. Une zone non traduite en 5' peut contenir une zone de gène de graine de plante réagissant à ABA ou à AB13. Une séquence de codage de peptide de signal de sécrétion de plante peut également être inclue. Une zone de codage de protéine hétérologue intégrée, codant une protéine recombinante, peut être fournie dans un cadre de lecture ouvert avec la séquence de codage de peptide de signal. Une zone non traduite 3' peut être produite laquelle possède un signal de polyadénylation.

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