Enrichment of fetal cells from maternal blood

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

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C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/24 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/554 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2200294

Methods of preparing fetal cells from samples of maternal peripheral blood are provided. A suspension of mononuclear cells is prepared from a maternal blood sample. Maternal cells are then depleted from the sample by adding magnetically coupled antibodies specific for markers present on adult cells, followed by binding the cells to a column in the presence of a magnetic field. From the depleted fraction, fetal erythrocytes are enriched by magnetic cell sorting (MACS). These nucleated erythrocytes are then used as a source of fetal genetic material, which is analyzed for the presence of chromosomal or genetic abnormalities, or for the presence of a Y chromosome, by conventional methods such as probes for in situ hybridization, metaphase spreads, and polymerase chain reaction (PCR).

Procédés pour préparer des cellules foetales à partir d'échantillons de sang périphérique maternel. Une suspension de cellules mononucléées est préparée à partir d'un échantillon de sang maternel. Les cellules maternelles sont ensuite appauvries à partir de l'échantillon par l'addition d'anticorps couplés avec des particules magnétiques et spécifiques des marqueurs présents sur les cellules adultes, et la fixation des cellules dans une colonne en présence d'un champ magnétique. A partir de la fraction appauvrie les érythrocytes du foetus sont enrichis par triage magnétique des cellules. Ces érythrocytes nucléés sont alors utilisés comme source de matériau génétique du foetus, qui est analysé pour mettre en évidence des anomalies chromosomiques ou génétiques, ou pour rechercher la présence d'un chromosome Y, par des procédés conventionnels tels que l'hybridation in situ avec des sondes, l'examen des dispersions en métaphase et la technique d'amplification en chaîne PCR.

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