Enzymes for biopolymer production

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/53 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 9/88 (2006.01) C12N 15/54 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) C12P 7/62 (2006.01)

Patent

CA 2337099

In order to optimize the flux or flow of carbon intermediates from normal cellular metabolism into PHAs it is desirable to optimize the expression of the enzymes of the PHA biosynthetic pathway. Gene fusions are genetic constructs where two open reading frames have been fused into one and encode hybrid proteins and in some cases bifunctional hybrid enzymes. Linkers may be added to spatially separate the two domains of the hybrid protein. In the case of enzymes which catalyse successive reactions in a pathway, the fusion of two genes results in bringing two enzymatic activities into close proximity to each other. When the product of the first reaction is a substrate for the second one, this new configuration of active sites may result in a faster transfer of the product of the first reaction to the second active site with a potential for increasing the flux through the pathway.

Pour activer le flux ou la vitesse de transformation des intermédiaires carbonés du métabolisme cellulaire normal en PHA, une augmentation de l'expression des enzymes du processus de biosynthèse des PHA est souhaitable. Les fusions de gènes sont des constructions géniques dans lesquelles deux cadres de lecture ouverts ont été fusionnés en un seul cadre, et qui codent pour des protéine hybrides et dans certains cas pour des protéines hybrides bifonctionnelles. Des séquences de liaison peuvent être ajoutées pour séparer spatialement les deux domaines de la protéine hybride. Dans le cas d'enzymes qui catalysent des réactions successives dans un processus, la fusion de deux gènes a pour effet de rapprocher étroitement les deux activités enzymatiques. Lorsque le produit de la première réaction est un substrat pour la seconde, cette nouvelle configuration de sites actifs peut permettre un passage plus rapide du produit de la première réaction vers le second site actif, ce qui peut améliorer le débit du processus.

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