Established cells

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/37 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C12N 5/16 (2006.01) C12N 5/18 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01)

Patent

CA 2345442

Established cells derived from the retinal capillary endothelial cells, choroid plexus epithelial cells or brain capillary endothelial cells of a transgenic animal carrying a large T antigen gene of an SV40 temperature sensitive mutant tsA58. The cell line derived from the retinal capillary endothelial cells expresses the temperature sensitive SV40 large T antigen, a GLUT-1 carrier and a p-glycoprotein. The cell line derived from the choroid plexus epithelial cells expresses the temperature sensitive SV40 large T antigen gene and shows the localization of Na+ -K+ ATPase and the GLUT-1 carrier in the cell membrane. When cultured in a monolayer, it shows the localization of Na+ -K+ ATPase in the apical side. The cell line derived from the brain capillary endothelial cells expresses the temperature sensitive SV40 large T antigen, the GLUT-1 carrier, the p-glycoprotein, alkaline phosphatase and .gamma.-glutamyltransferase. A method for establishing immortalized cells by subculturing cells obtained from the retinal capillary endothelial cells, choroid plexus epithelial cells or brain capillary endothelial cells of the above-described transgenic animal. These cells are useful in screening drugs regarding the safety or efficacy thereof and studying for developing methods for the diagnosis or treatment of diseases relating to nutritional metabolism in retinal tissues and brain at the cellular level.

L'invention concerne des cellules établies dérivées de cellules endothéliales capillaires rétiniennes, de cellules épithéliales du plexus choroïdien ou de cellules endothéliales capillaires cérébrales d'un animal transgénique porteur d'un important gène d'antigène T de mutant tsA58 à sensibilité de température SV40. La lignée cellulaire dérivée des cellules endothéliales capillaires rétiniennes exprime l'important gène de mutant susmentionné, un vecteur GLUT-1 et une glycoprotéine p. La lignée cellulaire dérivée des cellules épithéliales du plexus choroïdien exprime l'important gène de mutant susmentionné et indique la localisation de NA?+¿ -K?+¿ ATPase ainsi que le vecteur GLUT-1 dans la membrane cellulaire. En culture dans une monocouche, la lignée indique la localisation de NA?+¿ -K?+¿ ATPase du côté apical. La lignée cellulaire dérivée des cellules endothéliales capillaires cérébrales exprime l'important gène de mutant susmentionné, un vecteur GLUT-1, la glycoprotéine p, la phosphatase alcaline et la .gamma.-glutamyltransférase. L'invention concerne également un procédé relatif à l'établissement de cellules immortalisées par repiquage des cellules dérivées des cellules endothéliales capillaires rétiniennes, des cellules épithéliales du plexus choroïdien ou des cellules endothéliales capillaires cérébrales de l'animal transgénique considéré. Les cellules en question sont utiles pour le criblage des médicaments, en termes de sécurité et d'efficacité, et pour l'étude de procédés de développement relatifs au diagnostic ou au traitement des maladies liées au métabolisme nutritionnel du tissu rétinien et du cerveau à l'échelon cellulaire.

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