C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/071 (2010.01) C12N 15/10 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/574 (2006.01)
Patent
CA 2316179
This invention provides a method for studying chromosomal gains and losses in cells from nipple aspirate fluid comprising the steps of: (1) aspirating fluid from breasts; (2) placing the samples of fluid obtained in step 1 onto dishes containing conditioned medium composed of a mixture of (a) supernatant from immortalized mammary epithelial cells and (b) mammary epithelial growth medium; (3) incubating the product of step 2 in a humidified incubator; (4) replenishing the medium in the dishes prepared in step 2 at regular intervals to maintain cell growth; (5) isolating the cells from the cultures; (6) preparing DNA from these cells; (7) amplifying the DNA; (8) labeling an aliquot of the amplified DNA; and (9) evaluating the labeled DNA for evidence of chromosomal gains or losses.
La présente invention concerne un procédé permettant d'étudier les gains et pertes chromosomiques dans des cellules issues du fluide d'aspiration du mamelon. Ce procédé comporte plusieurs opérations. L'opération (1) consiste à aspirer du fluide des seins. L'opération (2) consiste à placer les prélèvements de fluide de l'opération (1) dans des coupelles contenant un milieu conditionné. Ce milieu se compose d'un mélange (a) de fluide surnageant issu de cellules épithéliales mammaires immortalisées et (b) de milieu de culture épithélial mammaire. L'opération (3) consiste à faire incuber dans un incubateur humide le produit de l'opération (2). L'opération (4) consiste à compléter à intervalles réguliers le niveau de milieu dans les coupelles préparées dans l'opération (2), de façon à entretenir la croissance des cellules. L'opération (5) consiste à isoler les cellules des cultures. L'opération (6) consiste à préparer de l'ADN à partir de ces cellules. L'opération (7) consiste à amplifier l'ADN. L'opération (8) consiste à étiqueter une aliquote de l'ADN amplifié. L'opération (9) consiste à mettre en évidence dans l'ADN étiqueté les gains ou pertes chromosomiques.
Dickson Robert B.
Haddad Bassem R.
Mccormack Stephen J.
Georgetown University
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l. S.r.l./llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1588591