C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/82 (2006.01) C07K 14/085 (2006.01)
Patent
CA 2530956
A system for expression of a heterologous polypeptide in a transgenic host cell is disclosed. The system is based upon a transgene comprising a eukaryotic promoter operably linked to a DNA sequence comprising, in the 5' to 3' direction, a DNA sequence complementary to a sequence encoding a heterologous polypeptide, a DNA sequence complementary to an internal ribosome entry site, and a DNA sequence corresponding to a 3' untranslated region of a positive strand single-stranded RNA virus. Following introduction of a stimulus, the host cell synthesizes an RNA molecule complementary to a recombinant RNA encoded by the transgene. The stimulus can be a positive strand single-stranded RNA virus or a nucleic acid thereof. Because the complement of the recombinant RNA comprises an internal ribosome entry site and a sequence encoding a heterologous polypeptide, the host cell can synthesize the heterologous polypeptide.
L'invention concerne un système destiné à l'expression d'un polypeptide hétérologue dans une cellule hôte transgénique. Ce système est fondé sur un transgène comprenant un promoteur eucaryote lié fonctionnel à une séquence d'ADN comprenant, dans le sens 5' à 3', une séquence d'ADN complémentaire d'une séquence codant pour un polypeptide hétérologue, une séquence d'ADN complémentaire d'un site d'entrée de ribosome interne, et une séquence d'ADN correspondant à une région 3' non traduite d'un virus à ARN monocaténaire à brin positif. Après l'introduction d'un stimulus, la cellule hôte synthétise une molécule d'ARN complémentaire d'un ARN recombiné codé par le transgène. Le stimulus peut être un virus à ARN monocaténaire à brin positif ou un acide nucléique correspondant. Etant donné que le complément de l'ARN recombiné comprend un site d'entrée de ribosome interne et une séquence codant pour un polypeptide hétérologue, la cellule hôte peut synthétiser le polypeptide hétérologue.
Blake Cassels & Graydon Llp
Board Of Trustees Operating Michigan State University
LandOfFree
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