Expression system for factor viii

Details Expression system for factor viii Expression system for factor viii

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 5/10 (2006.01) C07K 14/755 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01)

Patent

CA 2354845

This invention describes a protein-free production process for proteins having factor VIII procoagulant activity. Generally, the process includes the derivation of stable human cell clones with high productivity for B-domain deleted Factor VIII, and (2) the adaptation of cells to grow in a medium free of plasma-derived proteins. More specifically, the process includes transfecting human cells with a vector, such as in the figure, comprising a selectable marker and a sequence coding for the protein having factor VIII procoagulant activity, selecting cells with a selection agent, and isolating clones expressing high levels of the protein having factor VIII procoagulant activity.

Cette invention concerne un procédé de production sans protéine destinés à des protéines ayant une activité procoagulante du facteur VIII. De manière générale, ce procédé comprend la dérivation de clones de cellules humaines stables présentant une forte productivité pour le facteur VIII supprimé du domaine B et (2) l'adaptation des cellules pour qu'elles croissent dans un milieu dépourvu de protéines provenant de plasma. De manière plus spécifique, le procédé consiste à transfecter des cellules humaines avec un vecteur, comme dans la figure, qui comprend un marqueur sélectionnable et une séquence codant la protéine ayant l'activité procoagulante du facteur VIII, à sélectionner des cellules à l'aide d'un agent de sélection et à isoler des clones qui expriment des taux élevés de la protéine ayant l'activité procoagulante du facteur VIII.

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