C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/79 (2006.01) C07K 16/00 (2006.01) C07K 16/12 (2006.01) C07K 16/42 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/13 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)
Patent
CA 2177988
A vector which is used for preparing an antibody variable-region library comprising a polypeptide containing the H-chain and/or L-chain variable regions of an antibody and expressed in the membrane-bound form on the surfaces of eukaryotic cells, and which is replicable in the cells containing the base sequence ALK (formula 1): 5'-PL-SL-CL-ML-AL-3' and/or the base sequence AKH (formula 2): 5'-PH-SH-CH-MH-AH-3' wherein PL and PH represent each a promoter; SL and SH represent each a base sequence coding for a signal peptide; CL represents a base sequence coding for the L-chain constant region of an antibody; CH represents a base sequence of the H-chain constant region of an antibody or a base sequence coding for a polypeptide containing at least CH1 of the H-chain constant region of an antibody; AL and AH represent each a poly A addition signal; "5'-" and "-3'" refer to the 5' side and the 3' side, respectively, of the base sequence; and ML and MH represent each a base sequence coding for the cell-membrane piercing region, provided either ML or MH may be a mere base linkage when the expression vector contains both the base sequences AKL and AKH. Cloning sites R1L, R2L, R1H and R2H are present within or in the vicinity of, respectively, SL, CL, SH and CH in order for the base sequences coding for the L-chain and H-chain variable regions to be readily inserted in between, respectively, SL and CL, and SH and CH.
Vecteur utilisable dans la préparation d'une banque de régions variables d'anticorps comportant un polypeptide contenant les régions variables de chaîne lourde et/ou de chaîne légère d'un anticorps, et étant exprimé sous forme membranaire à la surface des cellules eucaryotes. Ledit vecteur peut subir une réplication dans les cellules renfermant la séquence de bases ALK (formule 1): 5'-P¿L?-S¿L?-C¿L?-M¿L?-A¿L?-3' et/ou la séquence de bases AKH (formule 2): 5'-P¿H?-S¿H?-C¿H?-M¿H?-A¿H?-3', dans lesquelles P¿L? et P¿H? représentent chacun un promoteur; S¿L? et S¿H? représentent chacun une séquence de bases codant pour un peptide-signal; C¿L? représente une séquence de bases codant pour la région constante de chaîne légère d'un anticorps; C¿H? représente une séquence de bases codant pour la région constante de chaîne lourde d'un anticorps ou une séquence de bases codant pour un polypeptide contenant au moins le CH1 de la région constante de chaîne lourde d'une anticorps; A¿L? et A¿H? représentent chacun un signal d'addition polyadénylé; "5'-" et "-3'" se rapportent respectivement au côté 5' et au côté 3' de la séquence de bases; et M¿L? et M¿H? représantent chacun une séquence de bases codant pour la région traversant la membrane cellulaire, à condition que M¿L? ou M¿H? puisse ne représenter qu'une liaison de bases lorsque le vecteur d'expression contient l'une et l'autre des séquences de bases ALK et AKH. Des sites de clonage R1¿L?, R2¿L?, R1¿H? et R2¿H? sont présents à l'intérieur respectivement de S¿L?, C¿L?, S¿H? et C¿H?, ou au voisinage de ceux-ci, afin que les séquences de bases codant pour les régions variables de chaîne lourde et de chaîne légère puissent s'intercaler sans difficultés respectivement entre S¿L? et C¿L? et entre S¿H? et C¿H?.
Higuchi Kazuo
Kanno Kimiyoshi
Asahi Kasei Kabushiki Kaisha
Goudreau Gage Dubuc
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2021230