Expression vectors encoding epitopes of target-associated...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/00 (2006.01) C12N 5/078 (2010.01) A61K 39/00 (2006.01) A61K 39/12 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)

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CA 2469738

The invention disclosed herein is directed to methods of identifying a polypeptide suitable for epitope liberation including, for example, the steps of identifying an epitope of interest; providing a substrate polypeptide sequence including the epitope, wherein the substrate polypeptide permits processing by a proteasome; contacting the substrate polypeptide with a composition including the proteasome, under conditions that support processing of the substrate polypeptide by the proteasome; and assaying for liberation of the epitope. The invention further relates to vectors including a housekeeping epitope expression cassette. The housekeeping epitope(s) can be derived from a target-associated antigen, and the housekeeping epitope can be liberatable, that is capable of liberation, from a translation product of the cassette by immunoproteasome processing. The invention also relates to a method of activating a T cell comprising contacting a substrate polypeptide with an APC and contacting the APC with a T cell.

La présente invention a trait à des procédés d'identification d'un polypeptide apte à la libération d'épitopes comprenant, par exemple, des étapes d'identification d'un épitope d'intérêt; la mise à disposition d'une séquence de polypeptide substrat comprenant l'épitope, dans lequel le polypeptide substrat permet le traitement par un protéasome; la mise en contact du polypeptide substrat avec une composition comprenant le protéasome, dans des conditions qui favorisent le traitement du polypeptide substrat par le protéasome; et le dosage pour la libération de l'épitope. L'invention a trait également à des vecteurs comprenant une cassette d'expression d'épitopes domestiques. L'épitope/les épitopes domestique(s) peut/peuvent être dérivé(s) d'un antigène associé à une cible, et les épitopes domestiques sont aptes à être libérés, c'est à dire capables de libération, à partir d'un produit de traduction de la cassette par un traitement d'immunoprotéasome. L'invention concerne en outre un procédé d'activation d'un lymphocyte T comportant la mise en contact d'un polypeptide substrat avec une cellule présentatrice d'antigène (CPA) et la mise en contact de la CPA avec un lymphocyte T.

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