Flow-through electroporation system for ex vivo gene therapy

A - Human Necessities – 61 – N

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Details

A61N 1/30 (2006.01) A61N 1/32 (2006.01)

Patent

CA 2333394

This invention is a method, and apparatus for introducing a preselected molecule into a living cell by contacting the cell with the preselected molecule, and applying a multiple series of electrical pulses to the cell. The method can be utilized ex vivo. The multiple electrical pulses generate rotating electric fields which introduce transient pores in the living cell without killing the cell. The rotating electric fields are provided in a flow through chamber apparatus (100) having more than two electrodes (150). A three step pulse process, e.g., collection, electroporation, electrophoresis, is used to introduce the preselected molecule into the cell. A mechanical means (710) of repositioning cells between successive pulses is also provided. The apparatus can also provide a means (540) to pulse cells at different temperatures, and then after pulsing, let the cells recover for a specified residence time at another temperature.

Cette invention a trait à une technique ainsi qu'à l'appareil correspondant permettant d'introduire une molécule présélectionnée dans une cellule vivante par mise en contact de la cellule avec la molécule présélectionnée puis par application à la cellule de plusieurs séries d'impulsions électriques. Cette méthode peut être employée ex vivo. Les nombreuses impulsions électriques établissent des champs électriques tournants provoquant la formation de pores éphémères dans la cellule vivante sans toutefois tuer celle-ci. Ces champs électriques tournants sont créés dans un appareil à enceinte à flux traversant pourvue de plus de deux électrodes (150). Un processus par impulsions en trois phases, par exemple, collecte, électroporation, électrophorèse, est utilisé pour introduire la molécule présélectionnée dans la cellule. L'appareil, qui comporte un mécanisme mécanique (710) de repositionnement des cellules entre les impulsions successives, peut également être pourvu d'un équipement (540) qui envoie des impulsions à différentes températures et qui, après avoir lancé une impulsion, laisse les cellules se rétablir pendant un temps de séjour déterminé à un autre température.

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