Fluorescence-based detection methods and apparatus

Details Fluorescence-based detection methods and apparatus Fluorescence-based detection methods and apparatus

G - Physics

01

N

G01N 21/64 (2006.01)

Patent

CA 2632206

In apparatus for detecting the emission of fluorescent radiation from a sample in response to excitation by two or more different radiation sources (145, 160) over the same time period, each radiation source (145, 160) is imprinted with a modulation regime which can then be separately detected in the emitted fluorescent radiation. For instance in techniques based on fluorescent resonant energy transfer ("FRET"), the drive current to two or more different LED sources (145, 160) may be frequency modulated, or pulse width modulated, according to different modulation regimes. Responses of the sample, for instance of different donor/ acceptor probes contained in the sample, to each of the sources (145, 160) can then be separately detected by means of the different modulation regimes, even where the wavelengths or wavelength ranges of the responses are the same or overlapping.

Dans le dispositif selon l~invention servant à détecter l~émission de rayonnements fluorescents depuis un échantillon en réponse à une excitation par deux sources de rayonnement (145, 160) différentes ou plus en même temps, chaque source de rayonnement (145, 160) se voient attribuer un régime de modulation qui peut ensuite être détecté séparément dans le rayonnement fluorescent émis. Par exemple dans des techniques basées sur le transfert d~énergie résonnante fluorescente (~FRET~), le courant d~excitation de deux sources DEL (145, 160) différentes ou plus peut être modulé en fréquence, ou modulé en amplitude d~impulsion, en fonction de différents régimes de modulation. Les réponses de l~échantillon, par exemple de différentes sondes donneur/accepteur contenues dans l~échantillon, à chacune des sources (145, 160) peuvent alors être détectées séparément au moyen des différents régimes de modulation, même lorsque que les longueurs d'onde ou plages de longueurs d'ondes des réponses sont identiques ou se chevauchent.

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